Question

【題目】2006年，Yamanaka將Oct﹣4、Sox2、c﹣Myc和K1f4四個轉錄因子導入小鼠胚胎成纖維細胞，獲得“誘導多能干細胞”（iPSc）。雖然iPSC具有非常高的應用價值和前景，但應用于臨床仍有問題阻礙，例如其供體細胞需從患者皮膚穿刺獲得皮膚成纖維細胞，給患者帶來痛苦，同時誘導效率非常低，初始化效率甚至低于0.01%. 因此近年來iPSc研究熱點為如何選用來源便捷、數目充足的成熟體細胞，以及如何提高基因的轉錄效率。

（1）iPSc能在適當的誘導條件下分化為3個胚層的細胞，具有多能分化能力，類似_____細胞的特性。

（2）有科學家利用成熟的T淋巴細胞作為供體細胞，成熟的T淋巴細胞在體外不能增殖分化，利用刀豆蛋白A（ConA）活化成熟T淋巴細胞，使之增殖分化為_____細胞，在這里刀豆蛋白A（ConA）充當_____。

（3）為提高誘導為iPSc的效率，首先應提高運載體的導入受體細胞的效率，科學家利用HIV﹣1病毒改造的（無致病性，高感染性）慢病毒作為載體，這類慢病毒屬于_____（RNA/DNA）病毒。同時在慢病毒中構建GFP基因（綠色熒光蛋白基因）作為_____，以便直觀方便的檢驗慢病毒是否導入受體細胞。

（4）為驗證慢病毒對T淋巴細胞的轉導效率，科學家用腺病毒轉導T淋巴細胞作為對照，設置不同MOI（MOI＝轉染時的病毒顆粒數/細胞數）實驗組得到下圖結果，由此可得出的結論為_____________________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】胚胎肝細胞 效應T細胞、記憶 抗原 RNA 標記基因 在相同的MOI下與腺病毒相比，慢病毒的轉導效率有明顯提高，且隨著MOI的提高對T淋巴細胞的轉導效率也越高

【解析】

干細胞是具有分裂和分化能力的細胞，細胞的分化程度越高，分裂能力越強，因此，高度分化的細胞一般不會分裂，但是利用轉基因技術將有關基因導入到分化的細胞中，使細胞恢復分裂和分化能力。

（1）胚胎肝細胞是具有分裂和分化能力，能夠發育成不同的組織和器官，iPSc能在適當的誘導條件下分化為3個胚層的細胞，具有多能分化能力，因此，類似胚胎干細胞的特性。

（2）細胞免疫過程中，T細胞增殖分化形成記憶細胞和效應T細胞，因此這里刀豆蛋白A（ConA）充當抗原。

（3）HIV病毒的遺傳物質是RNA，這類病毒RNA病毒，在構建基因表達載體時，綠色熒光蛋白基因作為標記基因以便直觀方便的檢驗慢病毒是否導入受體細胞。

（4）分析柱狀圖可知，實驗的自變量是病毒的種類和不同的MOI，因此，在相同的MOI下與腺病毒相比，慢病毒的轉導效率明顯提高，且隨著MOI的提高對T淋巴細胞的轉導效率也提高。