Question

【題目】神經(jīng)纖毛蛋白-1 （ NRP-1） 是血管內皮生長因子的新型受體，通過參與多種信號轉導來促進腫瘤血管的生成。本研究將為 NRP-1 單克隆抗體靶向治療乳腺癌提供數(shù)據(jù)基礎。

（1）取乳腺癌 （MCF7）組織塊，運用_____技術獲得 MCF7 細胞用于后續(xù)實驗。 用重組的人_____蛋白對小鼠進行注射， 使小鼠產(chǎn)生免疫反應， 制備雜交瘤細胞，將雜交瘤細胞轉到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取培養(yǎng)孔中的________（填“ 上清液”或“沉淀細胞”），進行抗體陽性檢測。經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)，獲得 NRP-1 單克隆抗體 （ NRP-1 MAb） 。

（2）將 MCF7 細胞制成單細胞懸液，等量注入 4 組裸鼠右前腋下，接種后 3 天開始給藥， 共給藥 7 次。每隔 5 天測算一次腫瘤的腫瘤體積，如下圖所示。

對照組注射_____，從上圖中可以看出_____。

（3）注射不同劑量 NRP-1 MAb 33 天后，剝離腫瘤組織稱重，實驗結果如下圖：

該結果表明____________________________________________________。

（4）基于以上研究，科學家們對該抗體的用藥方式有兩種觀點：謹慎用藥和適宜濃度用藥。 你支持哪個觀點，并說出理由___________________________________。

Answer 1

【答案】動物細胞培養(yǎng) 神經(jīng)纖毛蛋白-1（NRP-1） 上清液 等量的生理鹽水 NRP-1 MAb 能夠有效地降低腫瘤的體積，中、高濃度抗體的降低效果比低濃度的效果更顯著 NRP-1 MAb 可以明顯降低腫瘤組織的重量，中、高濃度抗體的降低效果稍微沒有低濃 度的好，但這種差異并不顯著 ）第 1 種答案：支持謹慎用藥 理由：隨著治療時間的延長，中高劑量和低劑量的 NRP-1 MAb 在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)的不一致性可能會加大，應進行后續(xù)研究，現(xiàn)階 段謹慎用藥。 第 2 種答案：支持適宜濃度用藥 理由：該抗體已經(jīng)顯示了顯著的抑瘤效果，中高劑量和低 劑量的 NRP-1 MAb 在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上雖然出現(xiàn)了不一致性，但這種不一致性 很小，可以考慮適宜濃度用藥。

【解析】

動物細胞融合，又稱細胞雜交，指將兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，融合后形成具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。
單克隆抗體制備的過程中需要經(jīng)過兩次篩選，第一次用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；第二次用專一抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。

（1）取乳腺癌（MCF7）組織塊，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行分散處理后，運用動物細胞培養(yǎng)技術獲得MCF7細胞。要制備NRP-1單克隆抗體，需要用重組的人NRP-1蛋白對小鼠進行注射，使小鼠產(chǎn)生免疫反應，產(chǎn)生相應的漿細胞，與該漿細胞與骨髓瘤細胞進行融合處理，制備雜交瘤細胞。將雜交瘤細胞轉到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，可以從培養(yǎng)液即上清液中提取到單克隆抗體，可以用抗原-抗體雜交技術進行抗體陽性檢測。經(jīng)多次篩選和細胞培養(yǎng)，獲得NRP-1單克隆抗體（NRP-1 MAb）。

（2）實驗的自變量是給藥的劑量和時間，因變量是腫瘤的體積，對照組應該注射等量的生理鹽水，根據(jù)實驗結果可知，NRP-1 MAb 能夠有效地降低腫瘤的體積，中、高濃度抗體的降低效果比低濃度的效果更顯著。

（3）注射不同劑量NRP-1 MAb 33天后，剝離腫瘤組織稱重，根據(jù)實驗數(shù)據(jù)可知，NRP-1 MAb 可以明顯降低腫瘤組織的重量，中、高濃度抗體的降低效果稍微沒有低濃度的好，但這種差異并不顯著。

（4）支持謹慎用藥理由 ：隨著治療時間的延長，中高劑量和低劑量的 NRP-1 MAb 在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上出現(xiàn)的不一致性可能會加大，應進行后續(xù)研究，現(xiàn)階段謹慎用藥。

支持適宜濃度用藥 理由：該抗體已經(jīng)顯示了顯著的抑瘤效果，中高劑量和低劑量的 NRP-1 MAb 在降低腫瘤體積和降低腫瘤重量上雖然出現(xiàn)了不一致性，但這種不一致性很小，可以考慮適宜濃度用藥。