Question

【題目】微生物培養技術在醫療、工業生產、食品生產等方面均有應用。下表是一種培養基的配方，請回答下列問題：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
0．5g	1g	0．5g	2g	200mL

（1）此培養基中的蛋白胨主要為微生物提供______________________。在各種成分溶化后、分裝前，必須進行的操作是___________和滅菌。

（2）臨床使用抗生素前，有時需要進行細菌的耐藥性試驗，其大致過程是：將含有某種細菌的菌液用___________法接種在培養基表面并進行培養，最終形成單個的菌落；再分別將含有等劑量不同種抗生素的相同大小的圓形濾紙片置于該平板上有菌落的位置，繼續培養一段時間后，若濾紙片下的菌落死亡，說明該細菌對該抗生素___________（填“敏感”或“不敏感”）。

（3）用上述方法統計菌落數目時，一般選擇菌落在___________的平板進行計數。在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落。A同學的實驗結果產生的原因可能有___________（填序號）。

①由于培養基污染 ②沒有設置對照 ③由于操作失誤 ④由于土樣不同

（4）在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用___________法，這種方法能夠通過顏色反應直接對纖維素分解菌進行篩選。甲同學在實驗時得到了如圖所示的結果，則纖維素分解菌位于___________。

A．①②③ B．②③ C．①② D．③

Answer 1

【答案】碳源、氮源和生長因子 調節pH 稀釋涂布平板 敏感 30～300 ①③④ 剛果紅染色法 D

【解析】

1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養基，其基本過程為計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板五個步驟。
2、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株．篩選尿素分解菌應該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，配制培養基的一般操作是配制培養液、調整pH、分裝、包扎、滅菌、擱置斜面。微生物的計數常用稀釋涂布平板法接種，采用固體平板培養細菌時，要將培養皿倒置。

（1）培養基中的蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和生長因子。在各種成分溶化后分裝前，必須進行的是調節pH和滅菌。
（2）臨床使用抗生素前，有時需要進行細菌的耐藥性試驗，其大致過程是：將含有某種細菌的菌液用稀釋涂布平板法接種在培養基表面并進行培養，最終形成單個的菌落；再分別將含有等劑量不同種抗生素的相同大小的圓形濾紙片置于該平板上有菌落的位置，繼續培養一段時間后，若濾紙片下的菌落死亡，說明該細菌對該抗生素敏感。
（3）微生物的計數常用稀釋涂布平板法接種，可以獲得單個菌落進行統計菌落數目，通常選擇菌落數在30～300間的平板進行計數。在進行分離分解尿素的細菌實驗時，A同學從培養基上篩選出大約150個菌落，而其他同學只選擇出大約50個菌落，分析A同學的實驗結果產生的原因可能有：①由于土樣不同、②由于培養基污染、③由于操作失誤，是否設置對照實驗不影響實驗組的菌落數目。故對應題干選①③④。
（4）剛果紅是一種染料，可與纖維素形成紅色復合物，但不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應，在含有纖維素的培養基上添加剛果紅時，會形成紅色復合物，當纖維素被分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，據此就可以篩選出纖維素分解菌。據甲同學在實驗時得到的圖示結果圖中①是培養皿，②是培養基，③以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以纖維素分解菌位于其內，故選D。