Question

【題目】為證明青霉素在某種細菌產生抗藥性過程中所起的作用是選擇而非誘變,有如下實驗方案。其中,平板影印指用無菌絨布輕蓋在已長好菌落的原培養基上,然后不轉動任何角度,“復印”至新的培養基上進行接種。請回答:

（1）圖中擴大培養的過程中應選用__________培養基。利用__________分離法可獲得培養皿上菌落。

（2）圖中②過程培養基的配方如下:

成分	無機鹽	蔗糖	葡萄糖	尿素	牛肉膏	水	瓊脂	酚紅
培養基	+	-	+	+	-	+	+	-

結合圖形分析__________(“能”或“不能”)得出結論:該細菌可利用尿素作為氮源。理由是:__________。

（3） B組培養基中還添加了適宜濃度的青霉素,結果如圖所示。欲證明青霉素所起的作用是選擇,則應選取__________(A. a1 B. a2 C. b1或b2或3 D.任意一個菌落)菌落繼續培養在空白的A2培養皿中,待長出菌落后影印到含相同濃度青霉素的C培養皿中。

（4）預測上述A2和C培養皿中菌落的生長情況為__________(“相同”或“不同”),由此證明青霉素所起的作用是選擇。

（5）下列關于微生物培養的敘述,正確的是（_____）

A.實驗過程中所有器皿和培養基都必須用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌

B.實驗操作過程中必須打開超凈臺上的紫外燈和過濾風

C.涂布分離法,單菌落更易分開,但操作更復雜

D.采用劃線分離時,在每次劃線前都需蘸取菌液一次

Answer 1

【答案】 液體 涂布 不能 該細菌可能利用氮氣作為氮源或培養基中無酚紅,無法證明該細菌分解了尿素 A 相同 C

【解析】本題考查微生物的培養和分離的知識點，意在強化學生的識記和理解能力。

(1)液體培養基具有進行通氣培養、振蕩培養的優點，在通氣或在振蕩的條件下，有利于營養物質的攝入以及增加供氧量，所以有利于細胞生長，提高生微生物數量。故圖中擴大培養的過程中應選用液體培養基；菌種的分離常用涂布平板法。

（2）由表格內容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空氣中的氮氣作為氮源，故不能得出該細菌可利用尿素作為氮源的結論；并且培養基中未加入酚紅指示劑，不能對菌種作進一步的鑒定；

（3）欲證明青霉素所起的作用是選擇，菌種應在未添加青霉素的培養基中選擇，即選擇a1菌落繼續培養在空白的A2培養皿中擴大培養，待長出菌落后影印到含相同濃度青霉素的C培養皿中。

（4）如果A2和C培養皿中菌落的生長情況相同，則證明變異是在接觸青霉素之前就已經產生了，青霉素所起的作用是選擇。

（5）培養基用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，接種環等用具可用灼燒滅菌，A項錯誤；紫外線對人有傷害，如果超凈臺的玻璃關死，也沒必要開吹風，B項錯誤；常用接種方法中的稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株，可以計數，可以觀察菌落特征，但由于需要多次稀釋，操作較復雜，C項正確；采用劃線分離時，在每次劃線前都要對接種環灼燒處理，目的是清除殘留的菌種，如果再蘸取菌液，將達不到稀釋的目的，D項錯誤；

[點睛]：微生物培養中的易混點：1.無菌技術中對相關的器皿、接種用具和培養基等用不同的滅菌方法；2. 常用接種方法：平板劃線法一般多用于菌種的純化，可以觀察菌落特征；稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株，可以計數，可以觀察菌落特征；3.在以尿素為惟一氮源的培養基中加入酚紅指示劑，培養某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，這樣就能初步鑒定該種細菌能夠分解尿素。