Question

【題目】菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉入菊花，培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉基因菊花的技術流程，請據圖回答：

注：卡那霉素抗性基因(Kanr)作為標記基因，菊花葉片對卡那霉素高度敏感。

(1)為了促進土壤農桿菌吸收重組質粒，可用__________處理土壤農桿菌，使其處于感受態。

(2)將重組質粒導入土壤農桿菌的目的是利用農桿菌能夠_________________________的特點，使目的基因進入受體細胞中，并插入到菊花細胞的________________上，最終形成轉基因植株。

(3)將愈傷組織轉移到添加一定濃度植物激素和________的培養基中，在適宜條件下進行培養，篩選轉基因菊花。

(4)用PCR方法檢測轉基因菊花是否含有目的基因時，需根據____________________的核苷酸序列設計特異引物，以____________________為模板進行第一輪擴增。

(5)將轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲，實驗結果如下表所示。

①對照組應飼喂等量的_____________________________。

②據表分析，________________________差異顯著，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。

Answer 1

【答案】Ca2+（或“CaCl2”） 感染菊花（或“植物”）細胞，并將T-DNA轉移至受體細胞 染色體DNA 卡那霉素 抗蟲基因（目的基因） 轉基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”） 非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物 實驗組與對照組死亡率

【解析】

分析題圖：圖示為獲得轉基因菊花的技術流程圖。目的基因（抗蟲基因）和質粒構建基因表達；采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞；再采用植物組織培養技術將受體細胞培養成轉基因植株。

分析表格：實驗組的死亡率明顯高于對照組。

⑴通常用鈣離子處理細菌，使之處于感受態。

⑵根據農桿菌的Ti質粒中的T—DNA可以整合到受體細胞的染色體DNA上的特點，通常用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞。

⑶基因表達載體的構建中，需要標記基因，根據題意可知該標記基因為卡那霉素，因此需要在加入卡那霉素的培養基中選擇出成功轉入目的基因的菊花。

⑷利用PCR技術擴增目的基因時，需要根據目的基因的脫氧核苷酸序列設計引物，同時利用含有目的基因的DNA為模板進行擴增。

⑸實驗設計遵循對照原則，因此對照組應該加入非轉基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物；根據實驗組比對照組的死亡率高，說明轉基因菊花對菊天牛2齡幼蟲有較強的毒殺作用。