Question

【題目】為了增加菊花花色類(lèi)型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖 2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。

下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟环�的�?/span>

A. 用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒

B. 用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞

C. 在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞

D. 用分子雜交方法檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上

Answer 1

【答案】C

【解析】

根據(jù)圖示，在目的基因兩端，啟動(dòng)子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI的切點(diǎn)，因此可以用 EcoRI切割目的基因和運(yùn)載體；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物，菊花屬于雙子葉植物，可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可將目的基因C導(dǎo)入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞染色體的DNA上；質(zhì)粒中只有潮霉素抗性基因，被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞只對(duì)潮霉素具有抗性；目的基因分子水平上的檢測(cè)方法有：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

A. 用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI處理目的基因和質(zhì)粒，可以使目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端，再用連接酶把切口連起來(lái)就能構(gòu)建成重組質(zhì)粒，A正確；

B. 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物，菊花屬于雙子葉植物，故可用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)�入�?xì)胞，B正確；

C. 圖2中顯示標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，應(yīng)該在培養(yǎng)基中添加潮霉素篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D. 要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA是否插入目的基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)，D正確。