Question

【題目】電影《我不是藥神》中的格列寧是一種治療癌癥的靶向藥物，此類靶向藥物可稱為“生物導彈”。利用單克隆抗體來診斷和治療癌癥可能會成為攻克癌癥的重要手段，以下為單克隆抗體制備流程圖：

（1）若該圖中的單克降抗體與藥物結合制成“生物導彈”治療腸癌，則圖中特定抗原通常是_________。靶向藥物比普通的化療藥物療效高、毒副作用小是因為______________________。

（2）圖中誘導細胞融合時常用的化學試劑是_____________，選擇性培養基上未融合的親本細胞和_____________的細胞都會死亡，只有__________才能生長。

（3）近年來，科學家發現丁酸鈉對雜交瘤細胞產生單克隆抗體有一定的影響，某科研小組進行了相關實驗，結果如下表：

丁酸鈉對雜交瘤細胞產生單克隆抗體的影響

丁酸鈉的濃度（mmo1/L）	時間（h）
	48	96	144
0	1∶320	1∶640	1∶1200
0．25	1∶320	1∶1280	1∶2500
0．5	1∶160	1∶2500	1∶2500
0．75	1∶320	1∶320	1∶640

注：（表中比值表示抗體效價，1：#中#值越高表明越有利于抗體的產生）

該實驗過程中培養雜交瘤細胞的培養瓶放在了含的培養箱中培養，的主要作用是___________，該實驗的自變量為________________。在該實驗基礎上，請設計實驗：探究培養時間為144h，促進雜交瘤細胞產生單克隆抗體的丁酸鈉的最適濃度。

簡述設計思路：_______________________。

Answer 1

【答案】（腸）癌細胞（膜）表面的蛋白質 既不損傷正常細胞，又減少了用藥劑量 聚乙二醇 融合的具有同種核的細胞 融合的雜種細胞 維持培養液的pH 丁酸鈉的濃度和培養時間 在丁酸鈉濃度范圍內，設置系列更小濃度梯度實驗，培養時間144h，其余條件與原實驗相同，檢測各組抗體效價。（能夠正確體珂自變量的控制即濃度范圍和梯度、無關變量的控制、因變量檢測指標）

【解析】

1、單克隆抗體的制備

（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原，然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。

（2）獲得雜交瘤細胞

①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；

②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。

（3）克隆化培養和抗體檢測

（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖

（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取

2、單克隆抗體的應用

（1）作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優點。

（2）用于治療疾病和運載藥物。

（1）單克隆抗體在癌癥治療中可作為“生物導彈”，單克隆抗體有兩個V區，其中一個V區可以識別癌細胞表面特定的抗原（癌細胞表面的蛋白質），另一個V區可以和T細胞、抗癌藥物、放射性物質等結合，使其定向殺傷癌細胞，將癌細胞消滅掉而不影響正常細胞，所以療效高，毒副作用小。

（2）誘導動物細胞融合常用的誘導因素有電激、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒等。若該過程是制備單克隆抗體，在誘導細胞融合中，所形成的融合細胞有兩兩融合細胞3種：AA型、BB型、AB型，用來培養的融合細胞應該是AB型的雜交瘤細胞，從中選擇出它的方法是用選擇性培養基進行篩選，同種自身融合的細胞都不能存活，存活生長的是異種細胞融合的雜交細胞，雜交瘤細胞的特點是：既能無限繁殖，又能產生特異性抗體。

（3）細胞培養應在含有5%CO2的恒溫培養箱中進行，其中CO2的作用是維持培養液的pH。從表格中看出，實驗處理不同的素是丁酸鈉的濃度和處理時間，是實驗的自變量。檢測的指標是抗體效價為因變量。實驗數據顯示，培養時間為144小時，丁酸鈉的濃度為0.25～0.5 mmo1/L時，抗體效價最高。在這個濃度范圍內，為探究更適宜的濃度，可以設置系列更小濃度梯度的實驗相互對照，按照單克隆抗體的制備過程，在雜交瘤細胞的培養液中，分別加入等量的不同濃度的丁酸鈉溶液，再加入等量的同種雜交瘤細胞，在培養箱中培養144小時，檢測實驗組抗體的效價，確定較適濃度。