Question

【題目】黑茶常被壓縮為茯磚茶，其內的金黃色菌落俗稱“金花”，主要是冠突散囊菌，其內含豐富的營養素，對人體極為有益。回答下列問題：

（1）為分離茯磚茶中的冠突散囊菌，制備馬鈴薯瓊脂培養基→無菌水浸泡黑茶30min過濾獲得菌液→取0．2mL稀釋液接種在培養基平板上，在適宜條件下培養一段時間觀察菌落形態并計數。由培養基的配方可知，冠突散囊菌屬于______________（填“細菌”、“真菌”或“放線菌”）。若采用稀釋涂布平板法，應先做系列稀釋再涂布培養，確保以10倍等梯度稀釋的操作是每次均從上一個稀釋倍數的試管中取1mL菌液，再加入______________中進行稀釋，移液管使用過程中的無菌操作有______________（答出兩點即可）。

（2）冠突散囊菌能分泌淀粉酶催化茶葉中的淀粉轉化低聚糖，也能分泌氧化酶催化多酚類化合物氧化，使茶葉湯色變棕紅，消除粗青味。酶催化作用的機理是_______________；欲將多種相對分子質量不同的酶進行分離，可用______________法；淀粉酶適合采用______________法固定化技術生產麥芽糖漿；若要模擬冠突散囊菌分解茶湯中的成分，應該采用固定化細胞技術而非固定化酶，理由是固定化細胞能____________，使冠突散囊菌能發生連續的酶反應，分解茶湯中的成分。

Answer 1

【答案】真菌 9mL無菌水 移液管需要滅菌；操作時在酒精燈火焰旁進行；轉移菌液等操作不能接觸任何物體 顯著降低反應需要的活化能 凝膠色譜法 化學結合和物理吸附 固定一系列酶

【解析】

牛肉膏蛋白胨培養基適于培養細菌、麥芽汁瓊脂培養基適于培養酵母菌、馬鈴薯瓊脂培養基適于培養真菌等，真菌能夠大量生成淀粉水解酶，利用培養基中的淀粉。

固定化酶、固定化細胞的比較：

（1）馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基一般用于真菌培養，故冠突散囊菌屬于真菌，稀釋涂布平板法在稀釋菌液時，一般用無菌水稀釋，，確保以10倍等梯度稀釋，則需要加入1mL菌液，再加入9mL無菌水稀釋，涉及到的無菌操作包括移液管需要滅菌；操作時在酒精燈火焰旁進行；轉移菌液等操作不能接觸任何物體等；

（2）酶催化作用的機理顯著降低反應需要的活化能，分離不同相對分子質量的酶可以采用凝膠色譜法，由于酶分子較小，容易從包埋材料中漏出，因此酶更適合采用化學結合法和物理吸附固定法，固定化細胞可以催化一系列的酶促反應，有利于冠突散囊菌分解茶湯中的成分。