Question

【題目】測定水樣是否符合飲用水衛生標準，常用濾膜法測定大腸桿菌的數目。濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉移到含有伊紅美藍的培養基（EMB培養基）上培養→統計菌落數目，流程示意圖如下圖所示。其中，指示劑伊紅美藍可使大腸桿菌菌落呈現紫黑色。請據圖回答問題：

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進行滅菌處理的是_______________，與過濾有關的操作都要在______________旁進行。

（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養基上，這屬于微生物培養中的________操作。從物理狀態角度分析，EMB培養基屬于________培養基，從功能上分屬于_______培養基。

（3）某生物興趣小組的同學嘗試按照上述方法進行測定，無菌操作下將10mL待測水樣加入到90mL無菌水中，稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養基上的菌落數平均為124，紫黑色菌落數平均為31，則推測1L待測水樣中的大腸桿菌數目為________。

（4）大腸桿菌進行擴大培養時，用搖床振蕩培養的目的是__________________________。

（5）不同微生物培養的溫度和時間往往不同，在培養箱中培養時，細菌培養溫度________（填“高于”“低于”或“等于”）霉菌培養溫度，培養時間則_________（填“長于”或“短于”）霉菌培養時間。

Answer 1

【答案】濾杯、濾膜和濾瓶 酒精燈火焰 接種 固體 鑒別 3100 提供氧氣，使大腸桿菌與營養物質充分接觸 高于 短于

【解析】

濾膜法是檢測水樣中大腸細菌數量的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養基上，經培養后計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌的菌落即可推測計算出水樣中的大腸桿菌數；大腸桿菌在伊紅-美藍培養基上培養后菌落呈深紫色，并有金屬光澤。

（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進行滅菌處理的有濾杯、濾膜和濾瓶，與過濾有關的操作都要在酒精燈火焰旁進行，防止雜菌的污染。

（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養基上，可將濾膜上的菌體“復印”在培養基上，使其在培養基上生長，這屬于微生物培養中的接種操作。從物理狀態分析，EMB培養基屬于固體培養基，從功能上分析，由于培養基上加有伊紅美藍，所以屬于鑒別培養基。

（3）在無菌操作下將10ml 待測水樣加入到90ml無菌水中，即稀釋了10倍，稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養基上的菌落數平均為124，黑色菌落數平均為31，由于黑色菌落為大腸桿菌，所以可推測1升待測水樣中的大腸桿菌數目為31×（1000÷10）=3100個。

（4）用搖床振蕩培養，可達到供應微生物所需氧氣，同時使營養物質與大腸桿菌充分接觸的目的，使大腸桿菌的繁殖速度加快。

（5）不同種類的微生物，一般需要不同的培養溫度和培養時間，在培養箱中培養時，細菌培養溫度應高于霉菌培養溫度，但培養時間短于霉菌培養時間。