Question

【題目】為了培育高效利用木糖發酵產乳酸的菌株，科研人員將能利用木糖產乳酸的菌種搭載于中國“實踐八號”育種衛星，衛星返回后進行篩選，其主要流程如下圖，其中乳酸能溶解培養基中的碳酸鈣形成透明圈。請回答：

（1）與步驟②相比，步驟③的培養基成分還含有_______、______。兩培養基均以木糖作為唯一碳源的目的是________。

（2）步驟③中，應在________附近倒平板，不采用涂布接種的原因是_________。平板在適宜條件下培養一段時間后，篩選有透明圈的菌落作為候選菌。

（3）科研人員從候選菌中初步篩選出產乳酸能力較強的四種菌株，再通過連續轉接和液體發酵進行遺傳穩定性檢測，得到下表所示結果（單位：g·L-1），最終確定衛10為最優菌株，依據是________。

傳代次數	菌株
	衛10	衛32	衛56	衛69
2	70．78	71．23	70．52	69．24
5	70．23	69．52	67．46	65．65
8	69．58	62．16	60．52	61．53
11	70．75	55．69	52．42	55．72
14	69．42	42．28	40．22	44．38

（4）若要進一步探究衛10發酵的最適木糖濃度，試寫出實驗思路：________/span>。

Answer 1

【答案】瓊脂 碳酸鈣 篩選出高效利用木糖產乳酸的菌株 （酒精燈）火焰 乳酸菌是厭氧微生物，不能在培養基表面生長繁殖 隨傳代次數的增加，產生乳酸的量能保持穩定 配制不同木糖濃度的培養基進行發酵，測定、比較不同木糖濃度下的產乳酸能力，產乳酸能力最強的木糖濃度就是菌體發酵產乳酸的最佳木糖濃度

【解析】

1、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；

2、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統計樣品活菌數目的方法是稀釋涂布平板法。

3、平板劃線法：通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養基表面。

（1）步驟②是在液體培養基中擴大培養，步驟③是在平板培養基中分離培養，故其培養基成分還需加瓊脂和碳酸鈣。兩培養基均以木糖作為唯一碳源是為了篩選出高效利用木糖產乳酸的菌株。

（2）為了防止雜菌污染，應在火焰附近倒平板。由于乳酸菌是厭氧微生物，不能在培養基表面生長繁殖，故不采用涂布接種。

（3）根據實驗結果可知，隨傳代次數的增加，衛10產生乳酸的量能保持穩定，最終確定衛10為最優菌株。

（4）若要進一步探究衛10發酵的最適木糖濃度，可以配制不同木糖濃度的培養基進行發酵，測定，比較不同木糖濃度下的產乳酸能力，產乳酸能力最強的木糖濃度就是菌體發酵產乳酸的最佳木糖濃度。