Question

【題目】人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）細胞在HAT培養基中都不能存活。雜種細胞在分裂中隨機丟失人的染色體，但保留所有的鼠染色體。因此，利用人—鼠細胞融合技術可以將人類基因定位于特定的染色體上。

（1）將人的HPRT－細胞與小鼠的TK－細胞用________促進融合，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的_______細胞，稱為雜交細胞。然后培養在________培養基（HAT）中，最終篩選出人—鼠雜種細胞。細胞融合技術突破了有性雜交方法的局限，使____________成為可能。

（2）將存活下來的雜種細胞進行單克隆培養，獲得不同的細胞株，用堿性染料染色后鏡檢，觀察結果如下：

細胞株編號	1	2	3	4	5	6
所含人染色體編號	11，14， 17，22	7，11， 14，17	5， 7， 17，21	2， 9， 11，17	5，17， 18，20	2， 5， 17，19

由此可推測________基因在________染色體上。

（3）如果要確定人鳥苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應選擇UMP激酶缺陷的________（填“人”或“鼠”）細胞與相應細胞雜交，這樣的方法________（填“能”或“不能”）對小鼠的基因進行定位。

（4）經過基因測序發現UMP激酶缺陷是因為編碼它的基因中部的部分堿基替換造成的，結果可能導致（_____）

A.轉錄不能進行

B.合成的蛋白質分子缺少部分氨基酸序列

C.合成的蛋白質分子增加部分氨基酸序列

D.合成的蛋白質分子氨基酸數目不變

Answer 1

【答案】 PEG（或滅活病毒） 單核 選擇 遠緣雜交 TK 17 鼠 不能 BD

【解析】

根據題干信息已知，人的HPRT基因缺陷（HPRT-；TK+）和小鼠的TK基因缺陷（TK－；HPRT+）細胞在HAT培養基中都不能存活。據圖分析，將人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）細胞融合，形成融合細胞（HPRT+；TK+），在HAT培養基上讓其生長和分裂。

（1）將人的HPRT-細胞與小鼠的TK-細胞用PEG（或滅活病毒）促進融合，圖中顯示融合細胞的細胞核也發生了融合，形成了單核的融合細胞（雜交細胞）；然后培養在選擇培養基（HAT）中，最終篩選出人-鼠雜種細胞。細胞融合技術能夠突破有性雜交方法的局限，使得遠緣雜交成為可能。

（2）將存活下來的雜種細胞進行單克隆培養，獲得不同的細胞株，用堿性染料（或龍膽紫或醋酸洋紅）染色后鏡檢。根據表格中的數據分析可知，所有的細胞株都含有17號染色體，據此推測TK基因應該在17染色體上。

（3）如果要確定人鳥苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應選擇UMP激酶缺陷的鼠細胞與相應細胞雜交，這樣的方法不能對小鼠的基因進行定位。

（4）經過基因測序發現UMP激酶缺陷是因為編碼它的基因中部的部分堿基替換造成的，由于改變發生在基因的中部，因此不會導致轉錄不能發生，A錯誤；由于基因中部的部分堿基發生了替換，可能使得終止子提前，進而導致合成的蛋白質分子缺少部分氨基酸序列，B正確；堿基發生替換發生在中間，不會導致末端的終止子改變，因此蛋白質的氨基酸序列不會增加，C錯誤；堿基替換后可能導致氨基酸的種類發生改變，而合成的蛋白質分子氨基酸數目不變，D正確。