Question

【題目】干擾素是動物或人體細(xì)胞受到病毒感染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，具有抗病毒、抑制細(xì)胞增殖及抗腫瘤的作用。培育轉(zhuǎn)干擾素基因馬鈴薯植株的大致流程如圖所示。請回答下列問題：

（1）過程①中剪切質(zhì)粒和目的基因時所需要的工具酶是________________，使用上述酶的優(yōu)點(diǎn)是________________________（答兩點(diǎn)）。

（2）過程②中將重組質(zhì)粒導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌時，常用________處理根瘤農(nóng)桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，最終使干擾素基因插入馬鈴薯細(xì)胞的_________上。

（3）圖中過程③和過程④合稱為________技術(shù)，該技術(shù)能體現(xiàn)細(xì)胞的______。

（4）在分子水平上檢測轉(zhuǎn)基因是否成功包括三個方面：_________________

Answer 1

【答案】 PstI、EcoRI 可防止目的基因被破壞、確保目的基因以唯一方向和質(zhì)粒連接 Ca2＋ 染色體DNA 植物組織培養(yǎng) 全能性 檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入干擾素基因，檢測干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，檢測干擾素基因是否翻譯出干擾素

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，過程①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶；過程②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞，利用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；過程③表示脫分化形成愈傷組織；過程④表示再分化形成胚狀體，進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過程。

（1）據(jù)圖分析，過程①中剪切質(zhì)粒和目的基因時所需要的工具酶是PstI、EcoRI，分別使用這兩種限制酶，可以防止目的基因被破壞、確保目的基因以唯一方向和質(zhì)粒連接。

（2）圖中將重組質(zhì)粒（含有目的基因）導(dǎo)入根瘤農(nóng)桿菌時，常用鈣離子處理根瘤農(nóng)桿菌時，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入，最終使干擾素基因插入馬鈴薯細(xì)胞的染色體DNA上。

（3）圖中過程③表示脫分化，過程④表示再分化，兩者合成植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是植物細(xì)胞的全能性。

（4）在分子水平上檢測轉(zhuǎn)基因是否成功包括目的基因、mRNA和蛋白質(zhì)的檢測，即檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入干擾素基因，檢測干擾素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，檢測干擾素基因是否翻譯出干擾素。