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（1）Cre酶是該技術的關鍵酶，能隨機識別兩個相同的loxP序列，催化如圖1所示的反應。

通過Cre-loxP系統敲除基因的基本原理是：Cre酶隨機識別DNA分子上兩個相同的loxP序列并從特定位點切斷DNA雙鏈，切口被重新連接后，保留片段_____，從而實現目標基因的敲除。

（2）研究者設計圖2所示的DNA片段，轉人小鼠體內，獲得僅含一個圖2所示片段的轉基因小鼠。

①構建基因表達載體時，需用限制酶和_____酶處理三種熒光蛋白基因、兩種loxP序列，將它們與腦組織特異表達啟動子M相連接。

②研究者用顯微注射法將圖2所示表達載體導入小鼠的_____中，得到僅含一個圖2 所示片段的轉基因小鼠，再經過進一步篩選，獲得純合的轉基因小鼠a。

（3）圖2所示序列的兩個loxP1之間或兩個loxP2之間的基因，只會被Cre酶識別并切割一次。為使腦組織細胞中Cre酶的表達受調控，研究者將Cre酶基因與啟動子N（由信號分子X開啟)連接，獲得純合轉基因小鼠b，將圖3所示純合小鼠a和b雜交，得到F1。

①無信號分子X作用時，F1腦組織和其他組織細胞的色彩分別是_____。

②有信號分子X作用時，F1：出現“腦彩虹”，請闡述機理：_____。

（4）研究者希望具有更豐富的顏色組合，即在一個細胞內隨機出現兩種或兩種以上顏色疊加，形成更多顏色的“腦彩虹”，請依據題目信息，寫出設計思路：_____。

（1）與A方式相比，B方式的主要特點是需要借助_______，參與該物質合成、加工的具膜細胞器有____________________。

（2）胰島B細胞分泌胰島素是通過______（請填圖中英文字母）方式進行，隨后胰島素隨血液運輸到達靶細胞，與細胞膜上的________結合，體現細胞膜的________功能。該種運輸方式體現出細胞膜具有_________的特點，具有這種特點的原因是_________________________。

（3）胰島素屬于一種分泌蛋白，教材中研究分泌蛋白的合成和運輸過程所用方法為________，該實驗的因變量為________________________。

（4）A、B、C、D四種方式中需要消耗能量的運輸方式是_________________。

（1）科研人員在圖1豌豆幼苗的c點處用IAA運輸抑制劑處理后，ab段GA1 含量顯著降低。由于豌豆幼苗的______________________部位產生的IAA，______________________運輸至c點以下，因此可以作出兩種假設，請補充完成假設二。

假設一：GA1在ab段中合成，來自c點以上的生長素促進合成過程。

假設二：GA1在c點以上合成并向下運輸，_____________________。

（2）已知豌豆幼苗中GA1的合成途徑如圖2所示，酶1催化無活性的GA20轉變成GA1。酶2催化則使GA20轉變成無活性的GA29。為驗證上述假設一，科研人員做了圖3所示實驗，三組豌豆都用放射性GA20處理d處葉片，一段時間后，測定ab段放射性強度。

①據圖可知，第2組去除頂端導致ab段GA1含量________________，第3組與第1組結果比較， IAA處理導致GA1含量比未處理時增加了約________________倍。

②分析第2組和第3組結果，結合圖2推測_________________。

③第2組ab段放射性總量明顯高于第1組，且GA29含量顯著高于GA1，其原因是_________________

（3）若從蛋白質水平進一步驗證假設一成立，請寫出研究思路并預期結果：____________________。

（1）配制培養基并分離微生物的步驟是：計算→稱量→溶化→調pH→______________→倒平板→______________→培養。篩選微生物的一般思路是，根據表型特征利用____培養基進行篩選。

（2）若某種微生物沒有明顯表型特征時，就無法通過上述方法篩選，科研人員通過圖所示的流程進行篩選。

①據圖分析，科研人員利用目標微生物編碼膜蛋白的____________________，構建表達載體，并導入用________________處理的大腸桿菌細胞中，獲取大量膜蛋白。

②用獲取的膜蛋白作為抗原，利用兔子制備單克隆抗體的具體流程是：_____。

（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，目的是_____目標微生物。 用流式細胞儀分離不同熒光強度的細胞，結果如圖2所示。對結果進行比較，應從區域_____（選填圖中數字）的細胞中篩選目標微生物。

（1）細胞生命活動過程中產生衰老、受損的細胞器或功能喪失的蛋白復合物時，B蛋白在細胞內招募L-II蛋白（由細胞質基質中的L-I蛋白轉變而來）等蛋白，啟動自噬過程，形成自噬體，自噬體最終融入_____中降解，這有利于保持細胞結構和功能的_____。

（2）科研人員用MV、CQ （自噬抑制劑）和RAPA（自噬誘導劑）處理胰腺癌細胞，96 h后 測定細胞內B蛋白、L-II蛋白、L-I蛋白含量，并以細胞內恒定表達的p-actin蛋白含量作為參照，得到下表所示結果。

①本實驗中，作為對照組的是_____組。

②L-II蛋白是定位在自噬體膜上的蛋白，在自噬過程結束時會重新轉變成l- I蛋白， 因而“L-II蛋白/L-I蛋白”可作為_____的一個觀測指標。

③比較1、2、3組結果，推測自噬過程_____（選填“促進”或“抑制”）癌細胞增殖，從物質與能量的角度分析，其原因是_____。

（3）綜合上述研究，請寫出MV影響胰腺癌細胞增殖的機制：_____。MV雖有抗胰腺癌的應用前景，但目前研究結果在很多方面尚不足以支持臨床醫學應用，請闡述理由：_____。

A.該實驗不能選取綠色植物成熟的葉肉細胞進行

B.若乙溶液的濃度稍增大，則曲線中b點左移

C.兩條曲線的差異僅是由甲、乙溶液濃度不同導致的

D.6 min時取出兩個細胞用顯微鏡觀察，均可看到質壁分離現象

A.該載體最可能為環形DNA分子

B.兩種限制酶在載體上各有一個酶切位點

C.限制酶R1與R2的切點最短相距約200 bp

D.限制酶作用位點會導致氫鍵和肽鍵斷裂

A. 右側液面高度下降；胰島素 B. 兩側液面高度不變；蔗糖酶

C. 兩側液面高度不變；麥芽糖酶 D. 兩側液面高度不變；蒸餾水

A. 某種藥物只抑制圖1中的c而對a無影響，說明該藥物抑制了c運輸過程中載體的作用

B. 圖2表示的植物細胞可能發生了質壁分離和復原的過程，此時植物細胞所處的溶液一定是KNO3溶液

C. 圖2中A點細胞失水量最大，此時細胞的吸水能力最強

D. 若溫度降低，對圖1中的a,b,c都會造成影響

A.已分化的小鼠體細胞在特定條件下可恢復全能性

B.四倍體囊胚由于染色體數目變異而無法發育為成體

C.本實驗使用到體外受精和胚胎分割移植等技術

D.誘導多能干細胞技術可應用于組織器官移植