Question

【題目】下圖是2019-nCoV病毒又稱新冠病毒（+RNA）的結構模式圖。生物學家根據RNA能否直接起mRNA作用而分成正鏈（+）RNA病毒與負鏈（-）RNA病毒兩種。負鏈RNA病毒（如毒彈狀病毒）的RNA不能作為mRNA，須先合成互補鏈（正鏈）作為mRNA，再翻譯蛋白質分子。回答下列問題：

（1）2019-nCoV病毒合成E蛋白的過程是______________，2019-nCoV病毒與HIV病毒在遺傳物質復制過程的不同之處是______________。

（2）S蛋白是2019-nCoV病毒表面主要抗原，要獲取大量S蛋白，首先需要利用2019-nCoV病毒獲取能產生S蛋白的目的基因。其方法是從培養2019-nCoV病毒的細胞中獲取mRNA，構建__________文庫，從中獲取目的基因，然后加上_____________構建完整的基因表達載體。

（3）與新冠肺炎康復者捐獻的血漿中的抗體相比，抗S蛋白的單克隆抗體的優點是______________，其制備的過程中，第二次篩選的目的是______________。

（4）在對新冠疑似患者的檢測中，有時會出現假陰性現象，除了核酸檢測這種方法外，在分子水平上還可以利用______________方法進行檢測。

（5）新冠肺炎重癥患者病情惡化的主要原因之一是，病毒感染過度激活人體免疫系統，導致肺部出現炎性組織損傷。在修復這些患者的肺損傷方面，干細胞被寄予厚望。因此干細胞治療成為一種可能，人的ES細胞在培養液中加入______________，就可誘導分化成不同類型的細胞，達到治療目的。

Answer 1

【答案】在宿主細胞（人體細胞）內以病毒自身RNA為模板指導合成的 2019-nCoV病毒的遺傳物質能夠在宿主細胞直接轉錄，即完成自我復制，而HIV病毒的RNA需要在宿主細胞內完成逆轉錄過程，然后再轉錄出自身的RNA cDNA 運載體質粒 特異性強、靈敏度高，可以大量制備 篩選出能產生特異性抗體（抗S蛋白抗體）的雜交瘤細胞 抗原--抗體雜交方法 分化誘導因子

【解析】

1.哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態上，表現為體積小、細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，即可以分化為成年動物體內任何一種組織細胞。

2.分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術

3.病毒是非細胞生物，專性寄生在活細胞內。病毒依據宿主細胞的種類可分為植物病毒、動物病毒和噬菌體；根據遺傳物質來分，分為DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白質組成。

（1）2019-nCoV病毒合成E蛋白的過程是在宿主細胞（人體細胞）內以病毒自身RNA為模板指導合成的，2019-nCoV病毒的遺傳物質能夠在宿主細胞直接轉錄，即完成自我復制，而HIV病毒的RNA需要在宿主細胞內完成逆轉錄過程，然后再轉錄出自身的RNA。

（2）S蛋白是2019-nCoV病毒表面主要抗原，為了獲取大量S蛋白，首先需要獲得能產生S蛋白的目的基因。具體方法是從培養2019-nCoV病毒的細胞中獲取mRNA，通過逆轉錄的方法構建cDNA文庫，從中獲取目的基因，然后加上運載體質粒構建完整的基因表達載體。

（3）單克隆抗體的優點是特異性強、靈敏度高，可以大量制備，抗S蛋白的單克隆抗體也具有上述優點，其制備的過程中，有兩次篩選過程，第一次要篩選出雜交瘤細胞，第二次要篩選出能產生特異性抗體（抗S蛋白抗體）的雜交瘤細胞。

（4）在對新冠疑似患者的檢測中，有時會出現假陰性現象，為此，人們又在分子水平上利用抗原--抗體雜交方法進行檢測，即用抗病毒抗原的相應抗體進行檢測，從而保證診斷的準確性。

（5）由于ES細胞具有發育的全能性，因此在人的ES細胞在培養液中加入分化誘導因子，就可誘導分化成不同類型的細胞，達到治療目的。