Question

【題目】枯草芽孢桿菌盛產蛋白酶，后者在生物醫藥和日用化工等生產領域具有重要的經濟價值，且已大規模產業化應用．

（1）在培養包括枯草芽孢桿菌在內的異養型微生物時，培養基營養成分應包括水和__（用序號組合回答）。

①淀粉 ②蛋白質 ③生長因子 ④葡萄糖 ⑤無機鹽

為篩選枯草芽孢桿菌的蛋白酶高產株，將分別浸過不同菌株（a～e）的分泌物提取液及無菌水（f） 的無菌圓紙片置于含某種高濃度蛋白質的平板培養基表面；在37℃恒溫箱中放置2～3天，結果如圖1。

（2）大規模產業化首選的菌株是__；菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區的原因是__。

圖2顯示枯草芽孢桿菌的蛋白酶和其它酶的熱穩定性數據，即酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶活性最高的溫度下測其酶活性．在該蛋白酶的工業化生產過程中，通常需對發酵液在60～70℃保溫一定時間，再制備酶制劑．

（3）在60～70℃保溫一定時間的作用是__。

A．誘導蛋白酶的熱穩定性

B．有利于發揮蛋白酶的最佳活性

C．裂解枯草芽孢桿菌細胞

D．大幅度降低發酵液中其他酶的活性

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應為__（選擇正確的序號并排序）。

①過濾 ②干燥 ③破碎 ④濃縮．

Answer 1

【答案】①②③⑤/②③④⑤ a ①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足；②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足；③分泌的蛋白酶活性低 D ①④②

【解析】

微生物的營養成分主要有：碳源、氮源、水和無機鹽等．大多數微生物是異養生物，在培養微生物時需要滿足其生長的溫度、pH和氧氣等條件。

（1）由于淀粉和葡萄糖都屬于糖類，能提供有機碳源，所以在培養包括枯草芽孢桿菌在內的異養型微生物時，培養基營養成分應包括水和①淀粉、②蛋白質、③生長因子和⑤無機鹽或水和②蛋白質、③生長因子、④葡萄糖或⑤無機鹽。

（2）根據題意和圖1分析可知：a周圍的透明圈最大，說明分泌的蛋白酶最多，所以大規模產業化首選的菌株是a．菌株b提取物周圍沒有形成明顯清晰區的原因是①不能合成蛋白酶或合成的蛋白酶量不足或②合成的蛋白酶不分泌或分泌量不足或③分泌的蛋白酶活性低。

（3）根據題意和圖2分析可知：在60～70℃時，其它酶的相對活性明顯比蛋白酶的相對活性低，所以保溫一定時間的作用是大幅度降低發酵液中其他酶的活性，故選D。

（4）枯草芽孢桿菌蛋白酶制備的合理工藝步驟應為①過濾→④濃縮→②干燥。