Question

【題目】蘇云金桿菌（Bt）能產生具有殺蟲能力的毒蛋白．如圖是轉Bt毒蛋白基因植物的培育過程示意圖（amp′為抗氨芐青霉素基因），①～④表示過程．請據圖作答：

（1）由HindⅢ酶切后，得到的DNA片段的末端堿基序列是__．

（2）將圖中①所示的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，產生__種DNA片段，②過程可獲得__種重組DNA．如果只用BamHⅠ酶切，目的基因與質粒連接后可獲得__種重組DNA．

（3）該過程中Bt毒蛋白基因插入Ti質粒后，不應影響質粒的__．

A．復制 B．轉錄 C．堿基對的數量D．抗性基因的表達

（4）用農桿菌的Ti質粒作運載體，目的是__．篩選含重組DNA的農桿菌，培養基中應添加__．

（5）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是__．

Answer 1

【答案】 4 2 2 ABD 利用農桿菌Ti質粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細胞染色體DNA上 氨芐青霉素 降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率

【解析】

分析題圖：圖示表示轉Bt毒素蛋白基因植物的培育過程，其中①是含有目的基因的外源DNA分子，其中含有限制酶HindⅢ、BamHⅠ和BstⅠ的切割位點，且BamHⅠ和BstⅠ的識別序列相同；②表示基因表達載體的構建過程．③表示采用農桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞的過程；④表示目的基因的表達。

（1）由HindⅢ酶識別序列為切后，因此，得到DNA片段的末端是。

（2）圖①中，從蘇云金桿菌的DNA被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成3種DNA片段．而質粒被HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后形成2種DNA片段，其中有1種與目的基因相同，所以反應管中有4種DNA片段。因HindⅢ、BamHⅠHind切割質粒可形成兩種長度不同的片段，因此用DNA連接酶連接形成的重組質粒有2種；而BamHⅠ切割質粒只能形成一種長度的片段，但可能會出現正向和反向連接，所以用DNA連接酶能連接形成2種重組質粒。

（3）質粒要能進行復制才能得到更多的表達產物，所以構建基因表達載體后，不能影響質粒的復制、表達和抗性基因的表達，故選ABD。

（4）用農桿菌的Ti質粒作運載體，目的是利用農桿菌Ti質粒的T﹣DNA，將Bt毒蛋白基因整合到植物細胞染色體DNA上。篩選含重組DNA的農桿菌，培養基中應添加氨芐青霉素。

（5）生產上常將上述轉基因作物與非轉基因作物混合播種，其目的是降低害蟲種群中抗Bt毒蛋白基因的基因頻率的增長速率。