Question

【題目】科研人員以馬鈴薯為材料研究膜蛋白S在植物體內(nèi)糖類(lèi)物質(zhì)運(yùn)輸及分配中的作用。

（1）CO2 在葉肉細(xì)胞的________中形成三碳化合物，經(jīng)過(guò)一系列過(guò)程轉(zhuǎn)化為淀粉儲(chǔ)存或以蔗糖形式運(yùn)輸至其他非光合器官利用。因此，葉片是光合產(chǎn)物的“源”，而_________ 等器官被看作是“庫(kù)”。

（2）科研人員從馬鈴薯細(xì)胞中提取RNA，經(jīng)_____，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到蛋白S 基因。將蛋白S基因與載體反向連接，導(dǎo)入馬鈴薯體細(xì)胞，再利用__________________技術(shù)，得到蛋白S低表達(dá)或不表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株。測(cè)定野生型和轉(zhuǎn)基因植株的塊莖重量和成熟葉片中糖類(lèi)含量，得到下圖所示結(jié)果。

與野生型植株相比較，轉(zhuǎn)基因植株的幾項(xiàng)生理指標(biāo)變化的原因是_____。

（3）研究發(fā)現(xiàn)，葉片合成的糖類(lèi)經(jīng)過(guò)韌皮部運(yùn)輸至塊莖，韌皮部細(xì)胞膜上有蛋白S。 為了驗(yàn)證蛋白S的功能，科研人員獲得蛋白S基因過(guò)表達(dá)的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行研究。

①將蛋白S基因過(guò)表達(dá)的韌皮部細(xì)胞置于一定濃度的14C標(biāo)記的蔗糖緩沖液中，一段時(shí)間 后，韌皮部細(xì)胞內(nèi)的放射性強(qiáng)度快速升高，并且顯著高于蛋白S基因正常表達(dá)的細(xì)胞。據(jù)此推測(cè)________。

②科研人員進(jìn)一步推測(cè)，蛋白S轉(zhuǎn)運(yùn)糖的過(guò)程是利用H+的濃度差跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，請(qǐng)寫(xiě)出 驗(yàn)證該推測(cè)的研究思路：________。

Answer 1

【答案】葉綠體基質(zhì) 根、莖(非綠色部分) 逆轉(zhuǎn)錄 目的基因的檢測(cè)與鑒定 蛋白S基因的表達(dá)狀況影響了植株的糖類(lèi)轉(zhuǎn)運(yùn) 蛋白S可能可以促進(jìn)糖類(lèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn) 設(shè)置若干梯度pH的等量14C蔗糖溶液，并以幾組差不多的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象以驗(yàn)證H+對(duì)蛋白S轉(zhuǎn)運(yùn)糖的影響

【解析】

1. cDNA文庫(kù)是指匯集以某生物成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄而成的cDNA序列的重組DNA群體；

2.分析題圖：蛋白S被抑制表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株的塊莖重量百分比變小而葉片中蔗糖、淀粉含量變多。

(1)CO2被固定生成C3化合物的過(guò)程為暗反應(yīng)，其發(fā)生場(chǎng)所為葉綠體基質(zhì)；植物的非光合器官，如莖(非綠色部分)、根等器官可以起到儲(chǔ)存養(yǎng)分的作用，因此可被看作是“庫(kù)”；
(2)RNA可通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到對(duì)應(yīng)的cDNA，然后利用PCR可擴(kuò)增該cDNA；目的基因被導(dǎo)入受體細(xì)胞后，可通過(guò)目的基因的檢測(cè)與鑒定技術(shù)來(lái)得到目的植株；根據(jù)圖表，蛋白S被抑制表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株的塊莖重量百分比變小而葉片中蔗糖、淀粉含量變多，這說(shuō)明蛋白S基因的表達(dá)狀況影響了植株的糖類(lèi)轉(zhuǎn)運(yùn)；
(3)①蛋白S基因的過(guò)表達(dá)使得韌皮部的蔗糖濃度大幅提高(表現(xiàn)在放射性快速升高)，因此蛋白S可能可以促進(jìn)糖類(lèi)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)；
②要驗(yàn)證H+的影響，可以設(shè)置若干梯度pH的等量14C蔗糖溶液，并以幾組差不多的韌皮部細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象以驗(yàn)證H+對(duì)蛋白S轉(zhuǎn)運(yùn)糖的影響。