Question

【題目】根據下圖回答問題。請回答：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SamⅠ	MspⅠ
識別序列及 切割位點	↓ GGATCC CCTAGG ↑	↓ AAGCTT TTCGAA ↑	↓ GAATTC CTTAAG ↑	↓ CCCGGG GGGCCC ↑	↓ CCGG GGCC ↑

（1）天然質粒往往需經過改造才能作為基因工程中的運載體，經改造后的質粒同時具備的條件有_____（填序號）。

①標記基因 ②多個限制酶切割位點 ③對受體細胞無害 ④能自我復制 ⑤起始密碼子

（2）若對天然質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩定性將會__________。

（3）在下圖上寫出目的基因左右兩側分別被SmaⅠ和EcoRⅠ切割后的末端（答案寫在答題紙的圖上）哪—種基因工程的基本工具可以連接平末端______________。

Answer 1

【答案】 ①②③④ 提高 T4-DNA連接酶

【解析】試題分析：本題結合基因結構圖來考查基因工程的技術和原理，重點是限制酶的考查，能根據圖中和表中信息選擇合適的限制酶，準確判斷使用DNA連接酶連接的結果，再運用所學的知識答題。

（1）天然質粒往往需經過改造才能作為基因工程中的運載體，經改造后的質粒同時具備的條件有①標記基因、②多個限制酶切割位點、③對受體細胞無害和④能自我復制，而⑤起始密碼子位于mRNA上。

（2）堿基之間的配對遵循堿基互補配對原則，即C-G，A-T，且C和G之間有3個氫鍵，A和T之間有2個氫鍵，因此C和G的含量越高，DNA分子熱穩定性也越高。SmaⅠ酶切位點中均為C-G堿基對，因此插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒中的C和G的含量就越高，其熱穩定性也就提高了。

（3）據酶的來源不同分為兩類，E．coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，二者都能連接黏性末端，但T4DNA連接酶還可以連接平末端。