Question

【題目】乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應用價值。乳糖酶的制備及固化步驟步如下：

(l)篩選產乳糖酶的微生物L時，宜用____作為培養基中的唯一碳源。從功能上講，這種培養基屬于____。

(2)在倒平板前，宜采用____方法對培養基進行滅菌，篩選該散生物時可用_____ 或釋涂布平扳法進行接種。

(3)純化后的乳糖酶通常可用____法進行蛋白質純度的鑒定以及檢測其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質電泳速度越快，說明其分子量越____。

(4)乳糖酶宜采用化學結合法（共價鏈結合法）進行固定化，可通過檢測固定化乳糖酶的 _______ 確定其應用價值，而制備固定化細胞一般常采用____。

Answer 1

【答案】乳糖 選擇培養基 高壓蒸汽滅菌 平板劃線法 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 小 （酶）活性【或（酶）活力】 包埋法

【解析】

微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

（l）篩選產乳糖酶的微生物L時，宜用以乳糖作為培養基中的唯一碳源；由于只有能利用乳糖的微生物才能在該培養基上生存，因此從功能上講，這種培養基屬于選擇培養基。
（2）對培養基進行滅菌應該采用高壓蒸汽滅菌法；接種微生物常用平板劃線法或釋涂布平扳法。
（3）純化后的乳糖酶通�？捎�SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進行蛋白質純度的鑒定以及檢測其分子量大小：在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質電泳速度越快，說明其分子量越小。
（4）乳糖酶宜采用化學結合法（共價鏈結合法）進行固定化，可通過檢測固定化乳糖酶的（酶）活性確定其應用價值，而制備固定化細胞一般常采用包埋法。