Question

【題目】牛奶是微生物生長的良好培養基。牛奶在飲用前都要經過巴氏消毒，以殺死有害微生物。為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進行如圖所示操作。請回答下列問題。

（1）牛奶用巴氏消毒的好處是_____________。

（2）圖中所用培養基在滅菌過程中，需用到高壓蒸汽滅菌鍋。下面是關于高壓蒸汽滅菌鍋使用過程中的操作，正確的先后順序是①②_____________④⑧⑨。（有的操作可以重復）

①裝入待滅菌物品②加蓋③加熱滅菌鍋④打開排氣閥⑤關閉排氣閥⑥切斷電源⑦壓力表的壓力降到零⑧打開蓋子⑨取出滅菌物品

（3）取最終的牛奶稀釋液0．1mL滴在培養基上進行涂布，應選擇的工具是下圖中_____________。

（4）圖中所示方法為稀釋涂布培養法，理想情況下，培養一段時間后可在培養基表面形成菌落。若用該方法培養設置了3個培養皿，菌落數分別為65個、63個、64個，則可以推測酸奶中每毫升含細菌數為_____________個，運用這種方法統計的結果往往較實際值_____________（偏大/偏小），如果培養基上出現_____________的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。

（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要進一步分離純化乳酸菌采用下圖所示的劃線分離操作，正確的是_____________，其正確操作過程中，劃線工具至少要灼燒_____________次。

Answer 1

【答案】牛奶的營養成分不被破壞 ③④⑤⑥⑦④⑧ B 6.4×108 偏小 （形狀、大小、顏色、光澤度）不同 B 5

【解析】

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等。

分析題圖：圖1表示的是稀釋涂布平板法，可以用來分離菌種和對菌種進行計數；圖2中A為接種環，B為涂布器，C為滴管，D為接種針。

（1）巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養成分不被破壞。

（2）高壓蒸汽鍋滅菌的操作步驟：①裝入待滅菌物品，②加蓋，③加熱滅菌鍋，④打開排氣閥，⑤關閉排氣閥，⑥切斷電源，⑦壓力表的壓力降到零，④打開排氣氣閥，⑧打開蓋子，⑨取出滅菌物品。

（3）將液體菌種滴在培養基上進行涂布的方法是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器，即圖中的B。

（4）據圖分析，圖中10mL酸奶稀釋了106倍，最后取了10mL稀釋液中的0.1mL，且3個培養皿中菌落數分別為65個、63個、64個，因此酸奶中每毫升含細菌數為( 65+63+64 ) ÷3÷0.1×106=6.4×108個。由于經此方法接種培養時，當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統計的結果往往較實際值偏小。如果培養基上出現（形狀、大小、顏色、光澤度）不同的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。

（5）要進一步分離純化乳酸菌采用平板劃線法進行操作，圖中所示的平板劃線分離的操作正確的是B圖；接種環在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，即圖B中的4次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結束后還需灼燒滅菌1次，以防止造成污染，因此完成圖B劃線共需灼燒接種環5次。