Question

【題目】豬O型口蹄疫是由O型口蹄疫病毒（FMDV）引起的急性、熱性、高度接觸性傳染病，還可感染牛、羊等偶蹄動物。VP1結構蛋白是該病毒的主要抗原，下圖是科學家設想利用基因工程技術培育番茄幼苗的過程。請回答下列問題：

（1）基因工程中，除去質粒外，可作為目的基因運載體的還有___________和___________。

（2）將重組質粒導入農桿菌前，用Ca2+處理農桿菌使其成為___________細胞。為了篩選得到含有VP1基因的受體細胞，可在培養基中添加___________。

（3）過程⑤⑥分別是___________和___________。將試管苗轉接到新的培養基上時，需要在超凈工作臺上進行，能有效避免___________的污染。植物微型繁殖技術能保持品種的___________。

Answer 1

【答案】動植物病毒 λ噬菌體的衍生物 感受態 卡那霉素 脫分化 再分化 微生物 優良性狀

【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）常見的運載體有質粒、動植物病毒和λ噬菌體的衍生物等。

（2）將重組質粒導入農桿菌前，需要用適當的Ca2+處理農桿菌使其處于感受態。重組質粒上含有卡那霉素抗性基因作為標記基因，標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，因此可在培養基中添加卡那霉素用于篩選得到含有VP1基因的受體細胞。

（3）過程⑤是將番茄葉片小段的外植體進行脫分化形成愈傷組織，過程⑥則為再分化。植物組織培養需要無菌操作，防止微生物污染。植物微型繁殖技術屬于無性繁殖，能保持品種的優良性狀。