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【題目】細胞周期按時間順序可分為四個時期:G1、S、G2和M期,如圖甲所示,各時期所發生的主要生理變化及部分調控因子如下表。請回答下列問題:

時期

主要生理變化

部分調控因子

G1

為遺傳物質DNA的合成作準備

CDK4

CDK2(G1/S 轉換)

S

DNA合成

CDK2

G2

主要完成蛋白質的合成,為進入分裂期作準備

CDK1(G2/M 轉換)

M

核膜消失,染色體等發生變化

CDK1

G0

靜息狀態,細胞不生長,也不分化

(1)DNA聚合酶作用于細胞周期的___________期(填字母),紡錘體形成于___________期(填字母)調控因子___________的表達量增多,促進細胞周期從G1期向S期過渡。

(2)G1期如果缺少某些必需的營養成分(如必需氨基酸),細胞會終止其G1期的進程,進入________期(填字母),一旦補充了所缺少的成分后,細胞將回到G1期,這種調節的意義是可以避免___________

(3)若圖甲中的1、2、3、4為一個細胞周期中的部分檢查點,在DNA發生損傷時有阻滯細胞周期的作用。當DNA損傷出現在___________期(填字母)時,CDK1形成的復合物滯留在細胞質中,不能進入細胞核內發揮作用,阻止細胞進入下一時期,可以推測檢查點最可能是圖甲中的___________(填數字)。

(4)胸苷(TdR)雙阻斷法可使細胞周期同步化,若G1、S、G2、M期依次為10h、7h、3h、1h,經常一次阻斷,S期細胞立刻被抑制,其余細胞最終停留在G1/S交界處;洗去TdR可恢復正常的細胞周期,若要是所有細胞均停留在G1/S交界處,第二次阻斷應該在第一次洗去TdR之后___________h到___________h進行。

【答案】 S M CDK2 G0 物質和能量的浪費 G2 3 7 14

【解析】試題分析:細胞分裂分為:DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。分裂期(M期);G1期、S期和G2期共同組成間期。細胞要連續經過G1→S→G2→M。在一個細胞周期內,間期和有絲分裂期所占的時間相差較大,間期大約占細胞周期的90%~95%,分裂期大約占細胞周期的5%~10%。細胞經過一個細胞周期需要的時間要視細胞的類型而定。

(1)DNA聚合酶催化DNA復制的 過程,因此其作用于分裂間期中的S期;紡錘體形成于有絲分裂前期,即M期;根據表格分析可知細胞周期從G1期向S期過渡時,調控因子CDK2增多。

(2)G1期如果缺少某些必需的營養成分(如必需氨基酸),細胞會終止其G1期的進程,則將不能進入S期,而是變成靜息狀態,細胞不生長,也不分化的G0期細胞;一旦補充了所缺少的成分后,細胞將回到G1期,這種調節可以避免物質和能量的浪費。

(3)根據表格分析可知,CDK1出現于G2期,主要是促進G2期向M期轉換,若DNA損傷導致CDK1形成的復合物滯留在細胞質中,不能進入細胞核內發揮作用,阻止細胞進入下一時期,說明DNA損傷發生在發生在期,應該在3處進行檢測。

(4)根據題意分析,經常一次阻斷,S期細胞立刻被抑制,則細胞至少停留在G1/S交界處,至多停留在S/G2交界處,前者通過7h達到后者,后者通過3+1+10=14h到達下一個周期的前者,因此若要是所有細胞均停留在G1/S交界處,第二次阻斷應該在第一次洗去TdR之后7h到14h進行。

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(3)步驟4中應選用限制酶___________切割重組質粒以獲得一段線性DNA,然后將其導入畢赤酵母菌細胞。為了確認畢赤酵母菌轉化是否成功,應在培養基中加入___________以便篩選。除此以外,還可以用分子雜交技術鑒定上圖中的畢赤酵母菌轉化是否成功,過程如下圖所示:

根據圖中顯示結果推算,若要獲得16個成功導入該基因的酵母菌菌落,則上圖中的酵母菌菌落數至少要為___________個。

(4)已知質粒在細胞傳代過程中有丟失現象,試分析畢赤酵母表達系統的遺傳穩定性高于大腸桿菌表達系統的主要原因_________________________________

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