Question

【題目】基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。根據(jù)圖示判斷下列操作正確的是(　　)

A. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割

B. 目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割

C. 質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

D. 質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

Answer 1

【答案】D

【解析】

試題根據(jù)題意和圖示分析可知：由于限制酶Ⅱ能識(shí)別限制酶Ⅰ的識(shí)別序列，限制酶Ⅰ不能識(shí)別限制酶Ⅱ的識(shí)別序列．要將目的基因從該DNA鏈中提取出來(lái)，需要在目的基因左右切開，所以要用限制酶Ⅱ；質(zhì)粒不能用限制酶Ⅱ，如果用該酶的話，質(zhì)粒就會(huì)有兩個(gè)切口．

解：限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣G↓GATCC﹣，限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣↓GATC﹣，可知限制酶II能夠識(shí)別和切割限制酶Ⅰ切割后的黏性末端．

根據(jù)題意和圖示分析可知：目的基因兩端分別是限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣G↓GATCC﹣和限制酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是﹣↓GATC﹣，只有用限制酶Ⅱ才能將目的基因切割下來(lái)．

質(zhì)粒有GeneI和GeneⅡ表示兩種標(biāo)記基因，分別有限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和限制酶Ⅰ的識(shí)別序列；如果用限制酶Ⅱ切割，則GeneI 和GeneⅡ都被破壞，造成重組質(zhì)粒無(wú)標(biāo)記基因；用限制酶Ⅰ切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA．

故選：D．