Question

【題目】我國肝損傷病的發生率較高，據研究，不同濃度的胰島素對減緩肝

細胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強：LPS是一種導致肝損傷的常見物質（用生理鹽水配制）。現欲以大鼠為材料驗證上述結論，回答下列問題：

（1）材料制備：

①肝細胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用______酶消化，經多次洗滌離心處理得到分散的肝細胞，加入適宜的細胞培養液置于卡氏瓶和CO2培養箱中進行______培養，將培養得到的肝細胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再______，置于相同且適宜的培養瓶中培養備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細胞懸液中。

（2）實驗方案及結果預期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的______。

②若本實驗的結果用細胞存活率作為檢測指標，各組的存活細胞數先用______測出OD值，然后計算各組的細胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細胞死亡對OD值的影響。

③用柱形圖表示各組的實驗結果。______

（3）實驗從細胞水平分析推測胰島素對減緩肝細胞損傷的機理可能有______（至少寫出二點）。

Answer 1

【答案】胰蛋白 原代 設置多個重復樣液 LPS 比色計 延緩細胞分裂、延緩細胞凋亡

【解析】

根據題意，該實驗的實驗目的為驗證不同濃度的胰島素對減緩肝細胞損傷有保護作用，且胰島素濃度越高保護作用越強。實驗自變量為不同濃度的胰島素，因變量為細胞損傷程度，可以用細胞的存活率來表示；為了使實驗更具有科學性，需要設置空白對照組和經作用后的對照組。

根據實驗目的、實驗設計原則和實驗的部分步驟，依據動物細胞培養的過程，可進行如下操作：

（1）材料制備：

①肝細胞懸液的制備：取某健康幼年大鼠的肝臟，適宜條件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，經多次洗滌離心處理得到分散的肝細胞，加入適宜的細胞培養液置于卡氏瓶和CO2培養箱中進行原代培養，將培養得到的肝細胞懸液隨機分為5組，編號為A-E，每組均需再設置多個重復樣液，置于相同且適宜的培養瓶中培養備用。

②胰島素溶液：用生理鹽水配制低、中、高三種濃度的胰島素溶液，分別加入到C、D、E組的肝細胞懸液中。

（2）實驗方案及結果預期：

①A組作為空白對照組，則往B、C、D、E組還需加入等量的LPS。

②若本實驗的結果用細胞存活率作為檢測指標，各組的存活細胞數先用比色計測出OD值，然后計算各組的細胞存活率=該組OD值/A組OD值*100%，不考慮細胞死亡對OD值的影響。

③實驗結果應為：胰島素濃度越高，細胞存活率越大，故用柱形圖表示各組的實驗結果：

（3）實驗從細胞水平分析推測胰島素對減緩肝細胞損傷的機理可能有延緩細胞分裂、延緩細胞凋亡等。