Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進(jìn)行了如圖A所示的實驗。

（1）步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中_______。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于______________培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的滅菌時間應(yīng)該從____________________開始計時。

（2）同學(xué)甲進(jìn)行步驟④的操作，其中．個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學(xué)的接種方法是__________________，出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的失誤操作是_____________。

（3）同學(xué)乙采用平板劃線法純化菌株，培養(yǎng)后的菌落分布如圖C，平板中部分菌落越來越稀少，因為是__________________________。

（4）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是_______________________________。

Answer 1

【答案】石油為唯一碳源 選擇 達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值 稀釋涂布平板法 涂布不均勻 劃線過程接種環(huán)上的菌種逐漸減少 篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌

【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選菌株的過程要使用選擇培養(yǎng)基，操作過程中要注意無菌操作，常用的固體培養(yǎng)基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法；微生物計數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計數(shù)板計數(shù)法。

（1）為篩選出能分解石油的細(xì)菌，步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中所以石油是唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。低溫常壓不能達(dá)到滅菌的目的，故培養(yǎng)基的滅菌時間應(yīng)該從達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值開始計時。
（2）接種細(xì)菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖B中該同學(xué)的接種方法為稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B的結(jié)果可能是操作過程中涂布不均勻?qū)е碌摹?/span>

（3）根據(jù)圖示：同學(xué)乙采用的接種方法是平板劃線法純化菌株，培養(yǎng)后的菌落分布如圖C，平板中部分菌落越來越稀少，因為是劃線過程每次劃線的菌種都來自上次劃線的末端，隨劃線次數(shù)的增加接種環(huán)上的菌種逐漸減少，最后形成分散成單個菌，進(jìn)而繁殖成菌落。

（4）步驟⑤后取樣測定石油含量，進(jìn)一步操作是為篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌。