Question

【題目】土壤中含有多種微生物，某研究小組欲分離能在Fe2+污染的土壤環(huán)境下生存的希瓦氏菌；進(jìn)行了相關(guān)研究。回答下列問(wèn)題：

（l）配制培養(yǎng)基：加入牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCI、H2O及________等并滅菌；該培養(yǎng)基按功能劃分，屬于_______培養(yǎng)基。

（2）分離希瓦氏菌：將10 g土樣溶于90 mL蒸餾水中，再稀釋成多個(gè)倍數(shù)，取多個(gè)稀釋倍數(shù)的土壤樣品液0．1mL分別接種到多個(gè)平板上，這樣做的目的是____；培養(yǎng)一段時(shí)間后，A、B研究員在105稀釋倍數(shù)下得到的結(jié)果：A涂布4個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是150、178、259、310;B涂布4個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是152、165、175、184，則每克土壤樣品中的希瓦氏菌數(shù)量最可能為________個(gè)。

（3）進(jìn)一步純化希瓦氏菌：采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域上幾乎無(wú)菌落，分析出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是________（答出兩點(diǎn)）。

（4）研究人員還欲采用測(cè)定ATP含量的方法估算希瓦氏菌數(shù)，該方法的依據(jù)是____________，此方法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)相比，得到的希瓦氏菌數(shù)目________（填“多”或“少”），原因是____________。

Answer 1

【答案】含高濃度的溶液 選擇 為了獲得菌落數(shù)量合適的平板，排除偶然因素造成的誤差 接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線；未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線 活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP，因此可用于估算數(shù)目 少 顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)中包括死細(xì)胞和活細(xì)胞

【解析】

1、微生物的營(yíng)養(yǎng)包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽，有些微生物還需要其他特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；

2、常用的平板接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。

（1）本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖欠蛛x能在Fe2+污染的土壤環(huán)境下生存的希瓦氏菌，所以在培養(yǎng)基中添加含高濃度Fe2+的溶液；這屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）取多個(gè)稀釋倍數(shù)的土壤樣品液0．1mL分別接種到多個(gè)平板上，這樣做的目的是為了獲得菌落數(shù)量合適的平板，排除偶然因素造成的誤差；對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)需要選擇30-300的菌落數(shù)目的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，計(jì)算公式為,所以每克數(shù)目為個(gè)。

（3）第一劃線區(qū)域上都不 間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域上幾乎無(wú)菌落，可能是因?yàn)榻臃N環(huán)灼燒后未冷卻就劃線（將菌種全部殺死）；未從第一區(qū)域末端開(kāi)始劃線（未接種菌種）。

（4）活細(xì)胞都需要ATP提供能量，所以可以采用測(cè)定ATP含量的方法估算希瓦氏菌數(shù)；由于死的細(xì)菌不能不能產(chǎn)生ATP，顯微鏡直接計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)中包括死細(xì)胞和活細(xì)胞，所以該方法得到的希瓦氏菌數(shù)目少。