Question

【題目】大量的科學(xué)研究已經(jīng)證明，VP40蛋白基因的基因突變或者VP40蛋白的缺失會(huì)終止埃博拉病毒的侵染行為，因此制備針對(duì)VP40蛋白的抗體可能是戰(zhàn)勝埃博拉病毒的新途徑。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程①中選用兩種限制酶切割，使目的基因的兩端獲得不同的黏性末端，這樣處理的目的是_______。

（2）圖中過(guò)程②需要用_________處理大腸桿菌。在基因表達(dá)載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有______，其作用是能夠被__________識(shí)別和結(jié)合，從而保證③順利完成。

（3）為檢測(cè)VP40基因是否成功表達(dá)，可以采用________技術(shù)。VP40蛋白抗體能夠戰(zhàn)勝埃博拉病毒的原因是____________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因環(huán)化（防止目的基因與質(zhì)粒錯(cuò)誤連接） Ca2+ （CaCl2） 啟動(dòng)子 RNA聚合酶 抗原-抗體雜交 VP40蛋白抗體與VP40蛋白結(jié)合，阻止了埃博拉病毒侵染細(xì)胞

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，③表示大腸桿菌產(chǎn)生VP40蛋白（作為抗原）；④誘導(dǎo)細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞。

（1）過(guò)程①中選用兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，可以使得目的基因和質(zhì)粒都露出兩種不同的粘性末端，可以防止目的基因環(huán)化、目的基因與質(zhì)粒錯(cuò)誤連接等。

（2）②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，需要用鈣離子處理大腸桿菌，使得大腸桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞；基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有啟動(dòng)子，是RNA聚合酶的識(shí)別位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

（3）VP40基因成功表達(dá)的產(chǎn)物是VP40蛋白，可以用抗原-抗體雜交進(jìn)行檢測(cè)；VP40蛋白抗體與VP40蛋白結(jié)合，阻止了埃博拉病毒侵染細(xì)胞。