Question

【題目】土壤中含有大量的難溶性磷酸鹽，為了從土壤中篩選出能夠將難溶性磷酸鹽轉化為植物能吸收的可溶性磷的優良解磷菌株，以便將其添加到有機肥中，改善植物磷元素供應，科研人員進行如下實驗：

實驗原理：固體培養基中難溶性磷酸鹽在微生物的作用下溶解，會在菌落周圍形成透明圈（如圖1），透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物溶解磷的能力大小。

實驗步驟:

步驟1 取某地區土樣5g制得土壤溶液后稀釋，取稀釋液lmL接種到基礎培養基A上，在適宜溫度下培養72h。

步驟2 在基礎培養基A上用接種環挑取代表性菌落再次接種，培養34d后觀察菌落特征和透明圈的大小，初步篩選出三種優良解磷菌株（如表）。

菌株	透明圈直徑（D）	菌落直徑（d）	D/d
M-3-01	18.8	12.3	1.5
B3-5-6	20.7	8.0	2.6
T1-4-01	9. 1	6.5	1.4

請據以上資料，回答下列問題：

（1）從物理形態上看，培養基A屬于_________培養基，為了篩選出優良解磷菌株，培養基中加入的磷源是_________。

（2）步驟1中的接種方法是_________，應該在_________旁完成操作。步驟2中對接種環采用的滅菌方法是_________滅菌。

（3）根據表中的實驗結果可以確定溶解磷能力最強的菌株是_________。

（4）為進一步測定初步篩選的三種菌株實際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎培養基B中，并在37℃、200r·min-l搖床培養，定期取上清液，測定溶液中可溶性磷含量，得到如圖2所示曲線。

①用搖床進行振蕩培養的好處之一是增加培養液中的_________。

②圖2所示曲線結果表明最優良的解磷菌株是_________。

Answer 1

【答案】固體難溶性磷酸鹽稀釋涂布平板法酒精燈火焰灼燒B3﹣5﹣6溶氧量（氧氣含量）M﹣3﹣01

【解析】

土壤是微生物的天然培養基。從土壤中篩選出能夠將難溶性磷酸鹽轉化為植物能吸收的可溶性磷的優良解磷菌株必須使用以難溶性磷酸鹽作為唯一磷源的選擇培養基。表格中的透明圈越大，菌落直徑越小，說明降解難溶性磷酸鹽的能量越強。據此分析作答。

（1）菌落必需在固體培養基上才能形成（培養過程中菌體不能運動）；要篩選溶解難溶性磷能力強的菌株，必須以難溶性磷酸鹽作為唯一磷源。

（2）步驟1的目的是從土壤微生物中篩選解磷微生物，由于土壤樣液中微生物種類和數量多，因此，最好采用稀釋涂布平板法進行接種，為了避免雜菌污染，應該在酒精燈火焰旁完成操作，接種環滅菌方法是灼燒滅菌。

（3）根據實驗原理中“透明圈直徑與菌落直徑比代表微生物溶解磷的能力大小”，結合表格數據可以確定解磷能力最強的菌株是B3-5-6。

（4）①搖床培養是實驗室培養需氧微生物的常用方法，使用搖床培養，不僅可以增大培養液中溶氧量，促進微生物的有機呼吸，而且能夠增加菌體與培養液的接觸，提高營養物質的利用率。

②根據實驗曲線圖，不難看出M-3-01實際溶解磷能力最強。