Question

【題目】下圖是制備抗埃博拉病毒(EBoV)VP40蛋白單克隆抗體的過程。請據圖回答：

（1）埃博拉病毒(EBOV)的遺傳物質是RNA，EBOV病毒容易變異的原因是____________。

（2）科研人員利用小鼠的B淋巴細胞與鼠的瘤細胞進行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，其特點是_________________，可以用此抗體與放射性同位素、化學藥物或細胞毒素相結合，制成“_______________ ”，抗擊埃博拉病毒(EBOV)。

（3）利用PCR獲取目的基因的過程中，反應體系內要加入含有VP40基因的DNA、dNTP、Taq酶和根據________________________合成的引物。

（4）選用EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切的優點是 ___________________________ ；VP40基因進入大腸桿菌細胞，并在大腸桿菌內維持穩定和表達，該過程可稱為_____________。

（5）過程⑥常用的不同于植物原生質體融合的促融方法是用_________________處理。

Answer 1

【答案】RNA是單鏈結構，穩定性差，突變率高 經EBOV免疫后特異性強、靈敏度高、可大量制備 生物導彈 目的基因的核苷酸序列 防止自身環化 轉化 滅活的病毒

【解析】

據圖分析，圖示過程涉及到基因工程的基本步驟和單克隆抗體的制備過程，其中①表示獲取目的基因，②表示構建基因表達載體，③表示將目的基因導入導入大腸桿菌，④表示從大腸桿菌獲取相應的蛋白質（VP40蛋白），⑤表示注射抗原，提取相應的B淋巴細胞，⑥表示通過細胞融合技術獲得形成雜交瘤細胞，⑦表示雜交瘤細胞的體外培養，獲得單克隆抗體。

（1）埃博拉病毒（EBO）的遺傳物質是RNA，而RNA是單鏈結構，突變率較高，穩定性較差，所以EBO病毒容易變異。

（2）經EBO免疫后小鼠體內可獲取漿細胞，其與鼠的瘤細胞進行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，即單克隆抗體，其特點是特異性強、靈敏度高、可大量制備；可以用此抗體與放射性同位素、化學藥物或細胞毒素制成“生物導彈”，抗擊埃博拉病毒（EBO）。

（3）PCR技術中，引物是根據目的基因的核苷酸序列合成的。

（4）EcoRⅠ和XhoⅠ切割形成的黏性末端不同，而DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來，因此為了防止目的基因反向連接、目的基因和質粒的自身環化，酶切時可選用的酶是EcoRⅠ和XhoⅠ。VP40基因進入大腸桿菌細胞，并在大腸桿菌內維持穩定和表達，該過程稱為轉化。

（5）過程⑥為誘導動物細胞融合，其不同于植物原生質體的促融方法是用滅活的病毒進行誘導。