Question

【題目】某校生物興趣小組進行探究“培養液中酵母菌種群數量與時間的變化關系”實驗，用血細胞計數板計數酵母菌數量。血細胞計數板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻璃制品，樣品滴在計數室內。計數室由25個中格、每個中格由16個小格、總共400個小格組成，每個計數室容納液體的總體積為0.1 mm3。請分析并回答問題：

（1）在吸取酵母菌培養液前應先將培養瓶______，滴加培養液時應先______，再滴加培養液。

（2）制片時，某同學進行了如下圖所示的操作，他統計出來的酵母菌數值比實際值______(選填“偏大”、“偏小”或“基本不變”)。

（3）若對培養液中酵母菌逐個計數是非常困難的，故通常采用______法進行計數，圖1是計數室中一個中格的酵母菌分布示意圖(●代表酵母菌)，該中格內酵母菌數量應計為______個。

（4）現觀察到圖2中所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內有酵母菌40個，則1 mL酵母菌培養液樣品中菌體數最接近______個。幾天后，由于酵母菌大量繁殖，每次計數前，需要對酵母菌樣液進行______處理，以方便計數。

（5）研究結果表明，酵母菌種群數量變化在一段時間內呈______型曲線增長。

Answer 1

【答案】振蕩蓋蓋玻片偏大抽樣檢測62×106稀釋S

【解析】

1、滴加培養液時應先蓋蓋玻片，再滴加培養液。

2、酵母菌個數計算：

① 16×25型的計數公式為：

酵母細胞個數／1mL=100個小方格細胞總數/ 100 ×100×10000×稀釋倍數

②25×16型的計數公式為：

酵母細胞個數／1mL ＝80個小方格細胞總數/ 80 ×100×10000×稀釋倍數

（1）吸取培養液前應將培養瓶輕輕振蕩，使酵母菌均勻分布。滴加培養液時應先蓋蓋玻片，再滴加培養液。這樣可以盡可能保證計數室被培養液充滿，以減少誤差。

（2）圖中是先滴加菌液，再加蓋玻片，容易使菌液沾到計數平臺兩側的支持柱表面，在支持柱表面形成一層水膜而使蓋片不能完全落在支持柱上。蓋玻片由于液滴的表面張力作用而未能嚴密的蓋到計數板表面上，使計數室內的體積增大，計數結果將偏高。

（3）培養液中酵母菌的數量比較多，逐個計數是非常困難的，通常采用抽樣檢測法進行計數。鏡檢計數方法：①方格內細胞的計數順序為左上→右上→右下→左下。②壓在方格線上的細胞只計左線和上線上的細胞數。③細胞若有粘連，要數出團塊中的每一個細胞。④出芽酵母的芽體體積若超過細胞體積的1/2，則算出獨立個體。⑤計數總數不少于300個細胞。壓在方格線上左線和上線的細胞數各1個，方格內細胞數是4個，因此該中格內酵母菌數量應計為6個。

（4）1 mL=1cm3=1000 mm3，1 mL酵母菌培養液樣品中菌體數約為：(1000 mm3/0.1 mm3) ×25×(40/5)=2×106。幾天后，由于酵母菌大量繁殖，可能粘連在一起，為了方便計數，每次計數前，需要對酵母菌樣液進行稀釋。

（5）由于資源和空間有限， 酵母菌呈“S”型曲線增長。