Question

【題目】2019年非洲豬瘟導致大量生豬死亡，造成重大經濟損失，為了盡快恢復生豬養殖，加快豬仔的供應，采用了圖示現代生物技術，為防止早期胚胎細胞異常凋亡，導入細胞調亡抑制基因Bcl-2，請回答下列問題：

（1）①過程需要對母豬注射____________激素，②過程體外受精前需要對精子進行____________處理，卵母細胞需要發育到____________期，才具備與精子受精的能力。⑤過程將獲得的早期胚胎移植到經過____________處理的受體母豬子宮內。

（2）利用PCR技術擴增獲得Bcl-2基因時，在第____________次循環結束后即可出現兩條鏈等長的目的基因片段。④過程需要用到限制酶和DNA連接酶，兩種酶作用的化學鍵____________（填“相同”或“不相同”）。

（3）基因表達載體導入受精卵常用____________法。用____________做探針，檢測Bcl-2基因在受精卵中是否轉錄出mRNA。

Answer 1

【答案】促性腺 獲能 減數第二次分裂中 同期發情 3 相同 顯微注射 放射性同位素標記的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段

【解析】

圖示為利用轉基因技術、體外受精技術、早期胚胎培養和胚胎移植技術培育轉基因豬仔的過程，其中①過程為卵母細胞和精子的采集，②過程為體外受精過程，③為載體，④過程為基因表達載體的構建，⑤過程為胚胎移植，⑥過程為妊娠過程。

（1）①過程包括卵母細胞的采集，需要對母豬注射促性腺激素，使其排出更多的卵子；②過程體外受精前需要對精子進行獲能處理，即利用培養法或化學誘導法使其獲得受精能力，卵母細胞需要發育到減數第二次分裂中期才具備與精子受精的能力。⑤過程將獲得的早期胚胎移植到經過同期發情處理的受體母豬子宮內。

（2）根據DNA的半保留復制，利用PCR技術擴增獲得Bcl-2基因時，在第3次循環結束后即可出現兩條鏈等長的目的基因片段。④過程構建基因表達載體需要用到限制酶和DNA連接酶，二者都作用于磷酸二酯鍵。

（3）基因表達載體導入受精卵常用顯微注射法，檢測目的基因是否在受體細胞中表達采用分子雜交技術，可用放射性同位素標記的含目的基因（Bcl-2基因）的DNA片段做探針，檢測Bcl-2基因在受精卵中是否轉錄出mRNA。