Question

【題目】常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，但自然界中的某些酵母可以分解木糖產生酒精，但對酒精的耐受能力較差，科學家們利用人工誘變的技術獲得了能利用木糖且對酒精耐受力強的釀酒酵母突變型，請回答下列問題：

（1）獲得上述突變型釀酒酵母的方法是：人工誘變后，使用_________________的液體培養基進行選擇培養。

（2）獲得上述突變型釀酒酵母后，需要進行分離純化，操作步驟如圖：

制備以上過程所需的培養基時需要倒平板操作，平板冷凝后需要倒置的原因是_______________，圖乙是圖甲過程A純化培養的結果，接種時劃線的順序是________，圖丙是圖甲過程C純化培養的結果，推測接種時主要的操作失誤是_____________。

（3）為測定突變型釀酒酵母的活性，用適宜濃度的海藻酸鈉溶液將活化的酵母細胞固定化后發酵無菌麥芽汁制酒，實驗中當海藻酸鈉濃度較低時，細胞活力較低原因是____。若發酵條件符合操作要求。10天后檢查發酵液發現麥芽汁幾乎無酒味，發酵失敗最可能的原因是____。

（4）在血紅蛋白的提取和分離實驗中，從紅細胞中釋放出血紅蛋白常用的方法是____，純化蛋白質常用的方法是___ 。

Answer 1

【答案】 木糖為碳源且添加一定濃度酒精的 防止皿蓋上的冷凝水落入培養基造成污染 ①③② 涂布不均勻 海藻酸鈉濃度較低時包埋不緊密，酶分子容易漏出，數量不足 將海藻酸鈉熔化時未冷卻就將活化的酵母菌液倒入 將紅細胞放在蒸餾水和甲苯溶液中吸水脹破 凝膠色譜法(或電泳、透析法、離心沉降法)

【解析】試題分析：由題意知：“釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產生酒精，但是對酒精的耐受能力差”，因此可以利用選擇培養基篩選釀酒酵母突變型。

（1）根據題意可知，“科學家們利用人工誘變的技術獲得了能利用木糖且對酒精耐受力強的釀酒酵母突變型”，因此獲得上述突變型釀酒酵母可以在人工誘變后，使用木糖為碳源且添加一定濃度酒精的液體培養基進行選擇培養。

（2）待平板冷凝后，要將平板倒置，其主要原因是防止培養皿蓋的冷凝水落入培養基造成污染。在培養基上接種時劃線的順序依次是每一區的劃線應從前一區劃線的末端位置開始劃線，從而能將菌種逐區減少，所以劃線順序是①③②；培養后菌落分布不均勻可能是接種時涂布不均勻造成的。

（3）酵母細胞的固定化的實驗中，當海藻酸鈉濃度較低時，包埋不緊密，酶分子容易漏出，數量不足，導致細胞活力較低。若發酵條件符合操作要求．10天后檢查發酵液發現麥芽汁幾乎無酒味，發酵失敗最可能的原因是將海藻酸鈉熔化時未冷卻就將活化的酵母菌液倒入。

（4）在血紅蛋白的提取和分離實驗中，從紅細胞中釋放出血紅蛋白常用的方法是將紅細胞放在蒸餾水和甲苯溶液中吸水脹破，純化蛋白質常用的方法是凝膠色譜法（或電泳、透析法、離心沉降法）。