Question

【題目】（銀負載二氧化鈦）作為一種常見的半導體光催化劑，在可見光照射下不僅可殺滅飲用水中的細菌等微生物，降解水中的有機化合物，還能循環利用，因此被廣泛使用。某研究小組制備了空心微球懸濁液，現欲探究不同載銀量的空心微球的殺菌性能。回答下列問題：

（1）培養大腸桿菌：制備適宜大腸桿菌生長的培養基，將培養皿、培養基等置于________中滅菌20min；在無菌環境中倒平板，待平板冷凝后，將平板倒置，是為了________；將大腸桿菌制備成菌懸液，分離純化。

（2）殺菌性能檢測：挑取菌落制成菌懸液，用________（工具）接種于無菌平板表面，使其均勻生長，布滿平板；將浸透了________的小濾紙片（實驗組）和浸透了________的小濾紙片（空白對照），分別放在涂布好的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養一段時間，觀察記錄________。

（3）測定飲用水所含的大腸桿菌數目，還有一種特別的方法：將已知體積的飲用水過濾后，將________放在加入________的培養基上（大腸桿菌菌落呈黑色），根據黑色菌落的數目，可計算出水樣中大腸桿菌的數量。這種計數方法較實際值有誤差的原因是________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌鍋 防止皿蓋上的冷凝水滴落，污染培養基 涂布器 不同載銀量的空心微球懸濁液 （等量）無菌水 濾紙片周圍抑菌圈（透明圈）大小（直徑） 濾膜 伊紅美藍 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

2、濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法。將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養基上，經培養后計數和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數。操作簡單、快速，主要適用于雜質較少的水樣

（1）制備適宜大腸桿菌生長的培養基時，培養皿與培養基常置于高壓蒸汽滅菌鍋20min；倒平板時要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是防止培養皿蓋上的冷凝水落入培養基造成污染，還能促進培養基表面水分的揮發。

（2）液體菌種進行稀釋涂布平板法接種時需要用涂布器。為防止培養基污染，用浸透了不同載銀量的Ag/TiO2空心微球懸濁液的小濾紙片作為實驗組和浸透了等量無菌水的小濾紙片作為空白對照，分別放在涂好菌的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養一段時間，觀察記錄濾紙片周圍抑菌圈（透明圈）大小（直徑）。

（3）伊紅美藍指示劑是鑒別大腸桿菌的指示劑，在測定飲用水所含的大腸桿菌數目時，將已知體積的飲用水過濾后，將濾膜放在加入伊紅美藍的培養基上，大腸桿菌菌落的顏色為具有金屬光澤的黑色。用稀釋涂布平板法的跡象微生物計數時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以此計數方法較實際值較低。