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【題目】科學家通過誘導黑鼠體細胞脫分化獲得誘導性多能干細胞(iPS),繼而利用iPS細胞培育出克隆鼠。流程如下:

(1)從黑鼠體內獲得一部分組織細胞,經過___________消化,使其分散成單個的細胞,然后置于培養液中放入_________________中保溫培養。在培養過程中細胞保持生長、分裂直至出現_____________現象,就要進行傳代培養。

(2)下列關于動物細胞培養的敘述,正確的是___________(多選)。

A.在10代以內的細胞大多具有正常的二倍體核型

B.某些癌細胞在合適條件下能逆轉為正常細胞

C.細胞克隆的最基本要求是必須來源于單個細胞

D.動物細胞培養液要添加血清等營養物質

(3)圖中重組囊胚通過_________技術移入白鼠子宮內繼續發育?寺∈蟮倪z傳物質主要來自圖中______鼠。為了提高成功率,代孕母鼠需進行激素處理,使其_____________。

【答案】 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) CO2培養箱 接觸抑制 ABCD 胚胎移植 同期發情

【解析】試題分析:據圖分析,從黑鼠體內獲得體細胞后,脫分化形成多能干細胞;從灰鼠體內提取出2-細胞胚胎,經過特殊處理形成囊胚,將多能干細胞移植到囊胚的內細胞團,形成重組胚胎,移植到白鼠子宮,形成克隆鼠。

(1)從黑鼠體內獲得組織細胞后,需要用胰蛋白酶處理,才能得到分散的單個細胞然后置于培養液中放入CO2培養箱中保溫培養。培養的細胞在貼壁成長至鋪滿培養皿底時停止分裂,這種現象稱為細胞接觸抑制

(2)在10代以內的細胞一般遺傳物質沒有發生改變,具有正常的二倍體核型,A正確;細胞癌變是原癌基因和抑癌基因突變引起的;基因基因突變具有不定向的特點,如果癌細胞在合適的條件下發生基因突變,有可能使突變后的原癌基因或抑癌基因變成正常的基因,使細胞失去癌細胞的特點,B正確。一個克隆是指1個細胞經培養形成的細胞群,多個祖細胞培養成的細胞群不是一個克隆,C正確;動物細胞培養液中為了保證營養全面,通常要在合成培養基的基礎上添加血清等營養物質,D正確。

小鼠胚胎干細胞可由囊胚的內細胞團分離培養獲得.iPS與ES細胞具有胚胎細胞的特性,體積較小,細胞核大,核仁明顯;同樣具有發育全能性,有望在對人類iPS細胞進行定向誘導分化后用于疾病的細胞治療.克隆技術屬于無性繁殖,不能豐富生物的多樣性,生物沒有進化,

(3)圖中重組囊胚通過胚胎移植技術移入白鼠子宮內繼續發育,暫不移入的胚胎可使用冷凍方法保存克隆鼠的遺傳物質主要來自圖中提供細胞核的黑鼠。為了提高成功率,代孕母鼠需進行激素處理,使其與供體黑鼠同期發情。

練習冊系列答案
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(1)在上述實驗中,為了防止目的基因和pBV220載體在酶切后的末端發生任意連接,酶切時應選用的酶是______________________。目的基因的長度為______pb(重組質粒上目的基因的插入位點與酶切位點之間的堿基對忽略不計)。pBV-IL1-His表達載體除了氨芐青霉素抗性基因(Ampr)、目的基因外還必須具有______________________等基因。

(2)轉化感受態大腸桿菌時需要用________處理細胞。利用PCR技術體外擴增DNA時,需將雙鏈DNA加熱到90℃以上,目的是___________________________。

(3)最后是通過________________技術來檢驗實驗是否成功。假設未檢測出目的蛋白,分析可能的原因有______________________________。(寫出一種即可)

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