Question

【題目】(1)要統計泳池水源中的活菌總數，應該采用的方法是_______________________。工作者將三個接種了等量水源水的培養基置于37℃的恒溫箱中培養。24小時后觀察到三個平板上的菌落數目為21、256、215，請分析結果出現的可能原因_____________________，并提供解決方案：______________________________________________________。

(2)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養基（成分見下表）：

注：“+”表示有，“-”表示無。

據表判斷，培養基甲_______（填“能”或“不能”）用于分離纖維素分解菌，原因是_____________________________________；培養基乙________（填“能”或“不能”）用于鑒別纖維素分解菌，原因是_______________________________________。

(3)果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括______________、_______________和果膠酯酶等，在果汁加工中，果膠酶可以起到_________________________等作用。

Answer 1

【答案】稀釋涂布平板法 涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板（或者后兩個平板被污染；或者操作失誤） 重做實驗 不能 液體培養基不能用于分離單菌落 不能 培養基中沒有纖維素，不會形成CR—纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 多聚半乳糖醛酸酶 果膠分解酶 分解果膠，瓦解植物細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易 果膠被分解成可溶性的半乳糖醛酸，使果汁變澄清

【解析】

1、選擇培養基是指通過培養混合的微生物，僅得到或篩選出所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養基上是不能生存的。

2、分解纖維素的微生物的分離的實驗原理：

①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。

②在培養基中加入剛果紅，可與培養基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

3、果膠物質主要存在于植物初生壁和細胞中間，果膠物質是細胞壁的基質多糖；果膠本質上是一種線形的多糖聚合物，果膠包括兩種酸性多糖（聚半乳糖醛酸、聚鼠李半乳糖醛酸）和三種中性多糖（阿拉伯聚糖、半乳聚糖、阿拉伯半乳聚糖）；果膠酶本質上是聚半乳糖醛酸水解酶，是一種蛋白質酶類物質，酶發揮作用需要適宜的條件，如pH，溫度等等，最適條件下，酶的活性最高，催化底物分解作用最快。

（1）要統計水源中的活菌總數，應該采用稀釋涂布平板法，對培養基上的菌落進行計數。根據題干信息可知，第一個平板菌落數偏低，可能是涂布第一個平板時涂布器未冷卻就涂布平板；后兩個平板菌落數偏高，因此也可能是后兩個平板被污染，因此最好重復實驗。

（2）培養基甲為液體培養基，不能用于分離和鑒別纖維素分解菌，因為纖維素分解菌鑒別培養基屬于固體培養基。培養基乙沒有纖維素，不會形成CR-纖維素紅色復合物，即使出現單菌落也不能確定其為纖維素分解菌，因此也不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。

（3）果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等，常用于果汁的生產，由于果膠物質主要存在于植物初生壁和細胞中間，因此在果汁加工中，果膠酶可以起到分解果膠，瓦解植物細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，同時果膠被分解成可溶性的半乳糖醛酸，還可以使果汁變澄清。