Question

【題目】絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒（TMV）基因，可以合成一種抗TMV蛋白，葉片對TMV具有抗感染性。煙草是重要的經濟作物，由于TMV的感染會導致大幅度減產。研究人員利用轉基因技術培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖所示，請據圖回答下列問題：

（1）科學家首先從絞股藍細胞中提取抗TMV基因轉錄的RNA，然后合成目的基因。圖中過程①表示________，獲得的DNA必須在兩側添加________和終止子，還要添加________酶能識別切割的堿基序列。

（2）由圖分析，在過程③構建的重組Ti質粒上應該含有的標記基因是________基因，重組Ti質粒導入煙草體細胞的方法是________。

（3）在過程⑤培養基中需要添加卡那霉素、植物必需的各種營養成分和植物激素，以保證 受體細胞能培養成再生植株。其中過程⑤添加卡那霉素的作用是_____________。

（4）在個體水平的鑒定過程中，可通過________的方法來確定植株是否具有抗性。

Answer 1

【答案】反轉錄 啟動子 限制性核酸內切 卡那霉素抗性 農桿菌轉化法 鑒定和選擇目的基因導入成功的受體細胞 接種煙草花葉病毒

【解析】

由圖可知，①是逆轉錄過程，③是構建基因表達載體，④是將目的基因導入受體細胞．⑤是目的基因的檢測與鑒定，⑥是植物組織培養過程。

（1）①是以RNA為模板合成DNA分子的過程，是反轉錄過程；必須在獲得目的基因兩側添加啟動子、終止子，同時需要添加限制性核酸內切酶能識別切割的堿基序列。

（2）重組Ti質粒上應該含有抗卡那霉素基因是標記基因；可以用農桿菌轉化法重組Ti質粒導入煙草體細胞。

（3）⑤是目的基因的檢測與鑒定，所以添加卡拉霉素的作用是鑒定和選擇目的基因導入成功的受體細胞。

（4）實驗的目的是培育出抗TMV的煙草，所以可以通過接種煙草花葉病毒來確定植株是否具有抗性。