Question

【題目】黃曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黃曲霉菌污染的飼料中，它可以通過食物鏈進入動物體內并蓄積，引起瘤變。某些微生物能表達AFB1解毒酶．將該酶添加在飼料中可以降解AFB1，清除其毒性。

回答下列問題：

（1）AFB1屬于類致癌因子。

（2）AFB1能結合在DNA 的G 上，使該位點受損傷變為G ' ，在DNA復制中，G '會與A配對。現有受損傷部位的序列為，經兩次復制后，該序列突變為。

（3）下圖為采用基因工程技術生產AFB1解毒酶的流程圖

據圖回答問題：

① 在甲、乙條件下培養含AFB1解毒酶基因的菌株，經測定，甲菌液細胞密度小、細胞含解毒酶：乙菌液細胞密度大、細胞不含解毒酶．過程l 應選擇菌液的細胞提取總RNA ，理由是

② 過程Ⅱ中，與引物結合的模版是（）

③ 檢測酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應采用方法。

（4）選取不含AFB1的飼料和某種實驗動物為材料，探究該AFB1解毒酶在飼料中的解毒效果。實驗設計及測定結果見下表：

據表回答問題：

①本實驗的兩個自變量，分別為____________。

② 本實驗中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的對照組是______________ 。

③ 經測定，某污染飼料中AFB1含量為100μg/kg ，則每千克飼料應添加 ___克AFB1解毒酶．解毒效果最好。同時節約了成本。

（5）采用蛋白質工程進一步改造該酶的基本途徑是：從提高每的活性出發，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的______序列。

Answer 1

【答案】 化學 甲 甲菌液細胞的AFB1解毒酶基因已轉錄生成了mRNA，而在乙菌液細胞中該基因未轉錄 AFB1解毒酶基因的 cDNA 抗原-抗體雜交 AFB1的有無和AFB1解毒酶的含量 B組（或B組+A組） 5 脫氧核苷酸

【解析】試題分析：(1)黃曲霉毒素B1（AFB1）是一種化學物質，屬于化學致癌因子。

(2)依題意可知：AFB1能使DNA中的G突變為G'，G'與A配對，受損傷部位序列為—AG'T—，該受損傷部位經兩次連續的復制過程以及突變后的序列如下：

（3）①分析相應的流程圖可知，獲取目的基因（AFB1解毒酶基因）的方法為反轉錄法，因此從細胞中提取的總RNA中，必須含有AFB1解毒酶基因轉錄形成的mRNA。已知甲菌液細胞含解毒酶，說明甲菌液細胞完成了AFB1解毒酶基因的表達，所以甲菌液含有合成AFB1解毒酶的mRNA模板，因此應選擇甲菌液的細胞提取總RNA；乙菌液細胞不含解毒酶，說明乙菌液細胞中的AFB1解毒酶基因未完成表達，所以乙菌液不一定含有合成AFB1解毒酶的mRNA模板，所以不應選擇乙菌液的細胞提取總RNA。

②過程Ⅱ是以cDNA為模板，采用PCR技術擴增AFB1解毒酶基因的過程，因此與引物結合的模版是cDNA。③從分子水平上檢測酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，應采用抗原—抗體雜交技術。

(4）①根據實驗設計應遵循的對照原則分析：A組與B組的自變量為是否添加AFB1；B組與C、D、E、F組形成對照，自變量為AFB1解毒酶的含量。

②反映解毒酶效果的對照組應為B組(或A＋B組)。

③表中信息顯示：E組、F組的解毒效果最好，但為了節約成本，每千克飼料添加5gAFB1解毒酶最適宜。

(5)蛋白質工程是從蛋白質的功能出發，推測應有的氨基酸序列，然后找到相應的脫氧核苷酸序列，最后通過基因修飾或基因合成達到目的。