Question

【題目】EV71是引發(fā)手足口病的一種人腸道病毒。為制備抗EV71的單克隆抗體，科研人員用小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（1）將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為______分別注射到3組小鼠體內(nèi)，引發(fā)小鼠機(jī)體的_______免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。

（2）多次免疫后，分別取上述3組小鼠的血清和未免疫小鼠血清，測(cè)定抗體與抗原的結(jié)合強(qiáng)度，結(jié)果如圖所示。

①EV71免疫的小鼠血清抗體_______（填“是”或“不是”）單一抗體，判斷依據(jù)是___________。

②測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度，目的是排除___________________的影響。

③制備抗EV71單克隆抗體時(shí)，選用_______免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳，依據(jù)是___________________________________________。

（3）取相應(yīng)免疫組小鼠的脾臟，剪碎并用________酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞，用滅活的病毒誘導(dǎo)，與________細(xì)胞融合，篩選獲得5個(gè)不同的雜交瘤細(xì)胞株。

（4）為進(jìn)一步研究抗體的作用效果，科研人員培養(yǎng)上述雜交瘤細(xì)胞株，獲得5種單克隆抗體，分別將它們與等量EV71混合，加入到5組RD細(xì)胞（EV71的宿主細(xì)胞）中，測(cè)定______________，以分析抗體的作用效果。

Answer 1

【答案】抗原 體液 不是 EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原 抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 VP1 第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2 胰蛋白 骨髓瘤 RD細(xì)胞對(duì)EV71的感染率

【解析】

本題主要考查人體免疫系統(tǒng)在維持穩(wěn)態(tài)中的作用及單克隆抗體制備過(guò)程。由題意分析可知，小鼠血清中含有多種血清，能和多種抗原結(jié)合。

（1）將EV71滅活病毒、EV71外殼蛋白VP1和VP2作為抗原，分別注射到3組小鼠體內(nèi)，引發(fā)小鼠機(jī)體的體液免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。
（2）①EV71免疫的小鼠血清抗體不是單一抗體，判斷依據(jù)是EV71免疫的小鼠血清可以結(jié)合EV71、VP1和VP2多種抗原。
②測(cè)定各組小鼠血清與非EV71蛋白結(jié)合強(qiáng)度，目的是排除抗體與其他蛋白的非特異性結(jié)合對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
③制備抗EV71單克隆抗體時(shí)，選用VP1免疫的小鼠脾臟細(xì)胞效果最佳，依據(jù)是第2組血清抗體可以結(jié)合EV71病毒（和VP1蛋白），第3組血清抗體無(wú)法特異性結(jié)合EV71病毒，僅能結(jié)合VP2。
（3）取相應(yīng)免疫組小鼠的脾臟，剪碎并用胰蛋白酶處理得到小鼠脾臟細(xì)胞，用滅活的病毒誘導(dǎo)，與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選獲得5個(gè)不同的雜交瘤細(xì)胞株。
（4）為進(jìn)一步研究抗體的作用效果，科研人員培養(yǎng)上述雜交瘤細(xì)胞株，獲得5種單克隆抗體，分別將它們與等量EV71混合，加入到5組RD細(xì)胞（EV71的宿主細(xì)胞）中，測(cè)定RD細(xì)胞被EV71感染概率，以分析抗體的作用效果。