Question

【題目】某實驗小組以洋蔥組織為實驗材料，進行DNA粗提取與鑒定的實驗，實驗主要過程如下圖，回答下列問題：

（1）步驟一中需加入一定量的洗滌劑和____________對洋蔥組織進行處理，加入前者是為了瓦解細胞膜結構，加入后者的目的是_________________。將攪拌和研磨后的物質進行過濾，即可得到含有DNA的濾液。

（2）步驟二是DNA純化過程中的關鍵步驟，可以采用以下幾種不同的方法：

①濾液中NaCl濃度在0.14 mol/L時可分離出DNA，若要再次提純，需要將其溶解在________mol/L的NaCl溶液中；

②通常會向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是____________________；

③將得到的DNA粗提取物放在60～75 ℃水浴中保溫10～15 min，蛋白質被破壞，但仍能得到純度較高的DNA，說明了DNA ____________________。

（3）步驟三中向濾液中加入DNA體積分數為95%的酒精的目的是______，依據的原理是_______。得到純凈的DNA后，可利用DNA與____________________在沸水浴條件下發生顯色反應，來對其進行鑒定。

Answer 1

【答案】 食鹽（氯化鈉） 溶解DNA 2 分解其中的蛋白質 具有較高的穩定性（或耐較高溫度） 析出DNA DNA不溶于酒精，但酒精可以使蛋白質變性并與DNA分離 二苯胺

【解析】（1）進行DNA粗提取和鑒定時，步驟一中需加入一定量的洗滌劑和食鹽（氯化鈉）對洋蔥組織進行處理，加入前者是為了瓦解細胞膜結構，加入后者的目的是溶解DNA，將攪拌和研磨后的物質進行過濾，即可得到含有DNA的濾液。

（2）步驟二是DNA純化過程中的關鍵步驟，可以采用以下幾種不同的方法：

①利用DNA在濃度為0.14 mol／L的NaCl溶液中溶解度最低可分離出DNA；若要再次提純，需要將其溶解在2mol／L的NaCl溶液中。

②通常會向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，由于嫩肉粉中含有蛋白酶，可破壞其中的蛋白質。

③由于DNA具有較高的穩定性（或耐較高溫度），將得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保溫10～15 min，則蛋白質被破壞，可得到純度較高的DNA。

（3）由于DNA不溶于酒精，但酒精可以使蛋白質變性并與DNA分離，故步驟三中向濾液中加入DNA體積分數為95%的酒精的目的是析出DNA。得到純凈的DNA后，可利用DNA與二苯胺在沸水浴條件下發生顯色（藍色）反應，來對其進行鑒定。