Question

【題目】Ⅰ.如圖：若以甲肝病毒表面抗原的基因為目的基因，以農桿菌的Ti質粒為載體構建基因表達載體，請分析回答：切割質粒時，應使用限制酶___________；成功建構的重組質粒上含有_______個限制酶C的識別位點。甲肝病毒表面抗原基因插入受體細胞的染色體DNA上是否表達，通常采用_________的方法進行檢測。

Ⅱ.單克隆抗體相對傳統方法制備的抗體，其優點有_______________；

相對化療，用“生物導彈”治療癌癥的優點是___________________。

相對雜交育種，植物體細胞雜交技術在育種上的優點是___________。

Ⅲ.下列有關胚胎工程的示意圖，分析回答：圖中的早期胚胎通常處于____________階段。在形態上，ES細胞具有體積小、_________的特點。

Answer 1

【答案】酶A和酶B2抗原-抗體雜交特異性強、靈敏度高、可大量制備療效高、毒副作用小克服遠緣雜交不親和障礙桑椹胚或囊胚細胞核大、核仁明顯

【解析】

限制性內切酶能識別DNA分子上特定的序列和切點并進行切割，限制性內切酶具有專一性，即一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸序列。被限制內切酶切開的DNA兩條單鏈切口，各含有幾個伸出的、可互補配對的核苷酸，這種切口就是黏性末端。黏性末端之間，只要切口處伸出的核苷酸間存在互補關系，就能在DNA連接酶的作用下連接起來。單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體，通常采用雜交瘤技術來制備。胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養等技術。

I．分析三種酶的識別序列和切割位點以及目的基因兩側的堿基序列可知，在目的基因的上游具有酶B的識別序列，下游有酶C的識別序列，即獲取目的基因時，應使用限制酶B和酶C；而目的基因應插入到質粒的T-DNA中，因此切割質粒時，應使用限制酶A和酶B；質粒上原本就有一個酶C的識別位點，而目的基因的酶C切割的黏性末端和質粒的酶A切割的黏性末端連接后，形成的序列也能夠被酶C識別，因此成功建構的重組質粒上含有2個限制酶C的識別位點。甲肝病毒表面抗原基因插入受體細胞的染色體DNA上是否表達，通常采用抗原-抗體雜交的方法進行檢測。

II．傳統方法產生的抗體種類繁多（盡管是單一抗原刺激），所以想要提取所需單一抗體極為困難，而單克隆抗體是由單一雜交瘤細胞產生，與傳統方法制備的抗體相比其優點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。生物導彈的概念是細胞靶向治療，相對化療其優點是療效高、毒副作用小。植物體細胞雜交可以將不同種的植物細胞融合成一個細胞，再利用植物組織培養技術將細胞培育成植株的過程，所以該方法打破了生殖隔離，克服了不同物種間遠源雜交不親和的障礙。

Ⅲ. 胚胎發育通常是指從受精卵起到胚胎出離卵膜的一段過程，卵細胞受精以后即開始分裂、分化，形成胚泡，先形成的細胞團為桑椹胚，然后形成囊胚，最后形成原腸胚，圖中的早期胚胎通常處于桑椹胚或囊胚階段。ES細胞也稱胚胎干細胞：胚胎干細胞是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態結構，在形態上，具有體積小、細胞核大、核仁明顯的特點。