Question

【題目】如圖所示，質粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四環素抗性基因（YR）．其中，XR內部含有限制酶KasI識別序列，YR內部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV識別序列，且這些識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列．

（1）質粒PBR322的本質是_____。FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV中限制酶的作用特點是_____．

（2）NaeI酶切目的基因和質粒，加入DNA連接酶連接后，進行大腸桿菌受體細胞導入操作。之后，受體細胞的類型包含_____

A．抗青霉素、抗四環素 B．抗青霉素、不抗四環素

C．不抗青霉素、抗四環素 D．不抗青霉素、不抗四環素

（3）若用KasI和FseI聯合酶切上述重組質粒，則可能產生的酶切片段數_____。

A.2 B．3 C．4 D．5

（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是_____。

A．受精卵能使目的基因高效表達B．受精卵可發育成動物個體

C．受精卵基因組更易接受DNA的插入D．受精卵尺寸較大，便于DNA導入操作

（5）若目的基因模板鏈中的TGA序列對應1個密碼子，翻譯時識別該密碼子的tRNA上相應的堿基序列是_____．通過篩選出的受體細胞內，目的基因能成功表達的原因是_____。

Answer 1

【答案】閉環雙鏈DNA 識別DNA特定的序列并在特定位點切割 ABD A B UGA 生物界共用一套遺傳密碼子

【解析】

分析題圖：質粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四環素抗性基因（YR），其中XR內部含有限制酶KasⅠ識別序列，YR內部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識別序列，五種酶的識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列。由于限制酶具有特異性，因此用KasⅠ和FseⅠ聯合酶切重組質粒，KasⅠ在XR可以切開一個位點，FseⅠ在YR也可以切開一個位點，這樣只能得到2段DNA片段。

（1）質粒的本質是雙鏈環狀DNA分子．由于限制酶具有特異性，只能識別DNA特定的序列并在特定位點切割。
（2）將圖中切開的質粒與目的基因溶液混合，加入DNA連接酶連接后，可能有以下三種情況：
①質粒自身環化或質粒與質粒結合，將它們導入受體細胞后，由于XR、YR基因都沒有被破壞，因此表現為XR、YR，A正確；
②有的質粒與目的基因連接形成重組質粒，這種重組質粒導入受體細胞后，由于YR基因被破壞，只有XR抗性，表現為XR、YS，B正確；
③目的基因自身環化或目的基因與目的基因結合，將它們導入受體細胞后，由于沒有抗性基因，因此表現為XS、YS，D正確。
故選：ABD。
（3）根據題意，XR內部含有限制酶KasⅠ識別序列，YR內部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ識別序列，五種酶的識別序列在整個質粒上均僅有一處，目的基因內部不存在這些識別序列。因此用KasⅠ和FseⅠ聯合酶切重組質粒，KasⅠ在XR可以切開一個位點，FseⅠ在YR也可以切開一個位點，這樣只能得到2段DNA片段，故選A。
（4）因為受精卵的全能性高，可以發育成動物個體，因此，動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞。故選：B。
（5）根據堿基配對原則，TGA序列對應的密碼子是ACU，密碼子ACU對應的tRNA上的反密碼子是UGA。所有的生物都共用一套密碼子，所以目的基因能成功表達。