Question

【題目】一個(gè)由英國(guó)倫敦帝國(guó)學(xué)院和芬蘭圖爾庫(kù)大學(xué)的科學(xué)家組成的研究小組日前開發(fā)出一種通過大腸桿菌制造丙烷的新技術(shù)。科研人員要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行研究和利用，需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)、分離、鑒定與計(jì)數(shù)等，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)，回答下列問題：

（1）培養(yǎng)基配制時(shí)需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，采用的方法是_____________，實(shí)驗(yàn)室常用的三種消毒方法的名稱是__________________________。在接種前通常需要檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測(cè)的方法是__________________________。

（2）圖1所示的方法是_____________，對(duì)分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的_____________進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。在5個(gè)平板上分別接入0．1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，5個(gè)平板上菌落數(shù)分別是19、61、64，65和66，則1g土壤中的活菌數(shù)約為___________個(gè)。

（3）圖2是某同學(xué)利用不同于圖1方法分離菌株的示意圖。下列對(duì)其操作的敘述正確的有_____________。

a．操作前用無水乙醇對(duì)雙手進(jìn)行消毒處理

b．不能將第⑤區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連

c．整個(gè)過程需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒

d．平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒 將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng) 稀釋涂布平板法 形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征 bcd

【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。菌落數(shù)計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

（1）培養(yǎng)基配制時(shí)需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，采用的方法是高壓蒸汽滅菌，實(shí)驗(yàn)室常用的三種消毒方法的名稱是：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒。在接種前通常需要檢測(cè)固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測(cè)的方法是：將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，觀察是否有菌落形成。

（2）由圖1的操作流程可以看出，圖1所示方法為：稀釋涂布平板法，對(duì)分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。利用稀釋涂布平板法測(cè)定細(xì)菌數(shù)時(shí)，篩選平板上的菌落數(shù)為30～300，所以1g土壤中的活菌數(shù)為個(gè)。

（3）圖2是通過平板劃線接種操作。

a、操作前用70%的酒精溶液對(duì)接種人員的雙手進(jìn)行消毒處理，a錯(cuò)誤；

b、在劃線操作時(shí)不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連，因此不能將第⑤區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連，正確；

c、在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，整個(gè)過程需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行6次灼燒，c正確；

d、由于正放培養(yǎng)平板蓋子上的冷凝水會(huì)順著流到培養(yǎng)基上和外面，引起雜菌污染，因此平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)，并且倒置有利于菌體呼吸，d正確。

故選bcd。