Question

【題目】2016年，日本科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一種細(xì)菌能夠消化塑料（PET）這種細(xì)菌通過分泌PET降解酶（PETase）來完成塑料分解。下圖是從細(xì)菌中獲取PET降解酶基因的流程示意圖，結(jié)合所學(xué)知識及相關(guān)信息回答下列問題：

（1）從細(xì)菌中提取DNA構(gòu)建基因組文庫和從基因組文庫中分離得到目的基因I，兩個(gè)過程都要用到的酶是_____________。

（2）B過程需要用到__________酶，用該方法形成的cDNA_________（選填“可以”、“不可以”）進(jìn)行物種間的基因交流。

（3）從兩種文庫中獲取的目的基因都可以利用__________技術(shù)大量擴(kuò)增，該技術(shù)的前提，是要有一段___________序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。

（4）由于大腸桿菌容易培養(yǎng)，科學(xué)家想把該基因?qū)�入大腸桿菌細(xì)胞中，在導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞前，通常采用__________處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種_____________的生理狀態(tài)。為檢測目的基因是否成功在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)，可采用______________技術(shù)。

Answer 1

【答案】限制酶 逆轉(zhuǎn)錄 可以 PCR 已知目的基因的核苷酸 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子 抗原—抗體雜交

【解析】

基因工程的操作步驟包括目的基因的獲取、構(gòu)建基因表達(dá)載體、把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測和鑒定。

（1）從細(xì)菌中提取DNA構(gòu)建基因組文庫需要用限制酶切割DNA，從基因組文庫中分離得到目的基因I也需要從受體菌中提取DNA并用限制酶切割。

（2）B過程是逆轉(zhuǎn)錄，需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶，cDNA可以進(jìn)行物種間的基因交流。

（3）目的基因都可以利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增，該技術(shù)的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。

（4）在導(dǎo)人大腸桿菌細(xì)胞前，通常采用處理大腸桿菌細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，即感受態(tài)。檢測目的基因是否成功表達(dá)，即檢測蛋白質(zhì)是否形成，可采用抗原—抗體雜交技術(shù)。