Question

【題目】人血清白蛋白(HSA) 具有重要的醫用價值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內標出另一條引物的位置及擴增方向。

（2）啟動子通常具有物種及組織特異性，構建在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是_____________（填寫字母，單選）。

A.人血細胞啟動子 B.水稻胚乳細胞啟動子 C.大腸桿菌啟動子 D.農桿菌啟動子

（3）利用農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需添加酚類物質，其目的是____________。

（4）人體合成的初始HSA多肽，需要經過膜系統加工形成正確的空間結構才有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優勢是____________________________________。

（5）為證明rHSA具有醫用價值，須確認rHSA與_________________的生物學功能一致。

Answer 1

【答案】（12分）（1）總RNA （或mRNA）

（2）B

（3）吸引農桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因成功轉化

（4）水稻是真核生物，具有膜系統，能對初始rHSA多肽進行高效加工

（5）HAS

【解析】

（1）合成總cDNA需提取細胞中所有的mRNA，然后通過逆轉錄過程獲得。采用PCR技術擴增HSA時，母鏈的方向是3＇到5＇，子鏈的延伸方向是5＇到3＇，兩條引物分別與模板鏈的5＇端互補配對結合，引導子鏈延伸，故兩條引物延伸方向是相反的。

（2）根據啟動子通常具有物種及組織特異性，在水稻胚乳細胞內特異表達rHSA，需選擇水稻胚乳細胞的啟動子。

（3）農桿菌具有趨化性，即植物的受傷組織會產生一些糖類和酚類物質吸引農桿菌向受傷組織集中轉化。研究證明，主要酚類誘導物為乙酰丁香酮和羧基乙酰丁香酮，這些物質主要在雙子葉植物細胞壁中合成，通常不存在于單子葉植物中。水稻是單子葉植物，不能產生上述的酚類化合物，故在農桿菌轉化水稻受體細胞的過程中，需要添加酚類化合物，吸引農桿菌移向水稻受體細胞，有利于目的基因的轉移。

（4）水稻是真核生物，具有生物膜系統，能對初始rHSA多肽進行加工才能形成正確的空間結構，獲得的HAS才有活性，而大腸桿菌是原核生物，細胞中不具有膜結構的細胞器，無法對初始rHSA多肽進行加工。

（5）為證明rHSA具有醫用價值，需確認rHSA與天然的HSA的生物學功能是否一致。