Question

【題目】下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，請(qǐng)根據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用________________________的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并加入________指示劑進(jìn)行鑒別。

（2）若取土樣5g，應(yīng)加入____________ml的無(wú)菌水配制成稀釋10倍土壤溶液。因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋?zhuān)�配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液，分別吸取0.1mL的稀釋液涂布到固體培養(yǎng)基上，這種接種方法稱(chēng)為________________。某同學(xué)用該方法接種后，在某個(gè)平板上沒(méi)有得到菌落，可能的原因是_______________________________________

（3）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計(jì)符合要求的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中_______________倍的稀釋比較合適。

稀釋倍數(shù)	103	104	105	106	107
菌落數(shù)	>500	367	248	36	18

（4）若需要將分離的菌種進(jìn)行長(zhǎng)期保藏，應(yīng)使用的方法是_______________________。

Answer 1

【答案】 以尿素為唯一氮源 酚紅 45 稀釋涂布平板法 涂布器灼燒后未冷卻就用于涂布，殺死了菌種 105和106 甘油管藏的方法

【解析】試題分析：本題考查微生物的分離、計(jì)數(shù)，考查土壤中分解尿素細(xì)菌分離原理、方法的理解和應(yīng)用。

（1）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并加入酚紅指示劑進(jìn)行鑒別。尿素分解產(chǎn)生的NH3使指示劑表現(xiàn)為紅色。

（2）取土樣5g，制成稀釋10倍土壤溶液，應(yīng)加入45ml的無(wú)菌水配。分離細(xì)菌并計(jì)數(shù)，應(yīng)使用稀釋涂布平板法。用該方法接種后，在某個(gè)平板上沒(méi)有得到菌落，可能的原因是涂布器灼燒后未冷卻就用于涂布，殺死了菌種。

（3）菌落數(shù)在30～300之間的平板符合技術(shù)要求，據(jù)表可知，105和106倍的稀釋比較合適。

（4）長(zhǎng)期保藏分離的菌種，應(yīng)使用甘油管藏的方法。