Question

【題目】資料顯示，中國每年約有13萬新增宮頸癌病例，占全球新發病例的三分之一，其中約有8萬女性去世。宮頸癌也是中國15歲至44歲女性中的第二大高發癌癥。人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發生密切相關，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監控宮頸癌的發生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據圖回答下列問題：

(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術有_________________________。

(2)對于抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/ mL，每孔加入細胞稀釋液_____ mL，使每個孔內細胞一般不多于一個，達到單克隆培養的目的。

(3)由上述過程生產出的單克隆抗體一般不能直接用于人體，理由是____________________。

(4)科學家從某些無限增殖細胞的細胞質中分離出了無限增殖調控基因(prG)，該基因能激發動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的制備單克隆抗體技術外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路。_______________________________________。

(5)利用蛋白質工程技術對抗HPV抗體進行改造以延長其體外保存的時間，其基本途徑是從_________________出發，設計_________________，進一步推測應有的氨基酸序列，進而確定對應的脫氧核苷酸序列，據此獲得相應基因。

Answer 1

【答案】動物細胞培養、動物細胞融合 0.1 小鼠形成的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應 通過基因工程向漿細胞中導入prG；(或：利用核移植技術將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中) 預期蛋白質（抗HPV抗體）的功能 蛋白質（抗HPV抗體）的結構

【解析】

動物細胞融合指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜種細胞。

單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次用選擇培養基篩選得到雜交瘤細胞；第二次用專一抗體檢測得到能分泌特定抗體的雜交瘤細胞。

（1）單克隆抗體制備過程中需要經過瘤細胞和漿細胞的融合及雜交瘤細胞的培養，故需要經過動物細胞培養和動物細胞的融合。

（2）對于抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/ mL，即每孔加入細胞稀釋液0.1mL，使每個孔內細胞一般不多于一個，達到單克隆培養的目的。

（3）由于來自于小鼠的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應，故一般不能直接用于人體。

（4）科學家從某些無限增殖細胞的細胞質中分離出了無限增殖調控基因(prG)，可以通過基因工程向漿細胞中導入prG，獲得能無限增殖又可以產生特定抗體的漿細胞。

（5）蛋白質工程的基本途徑：是從預期蛋白質功能出發，設計蛋白質的結構，進一步推測應有的氨基酸序列，進而確定對應的脫氧核苷酸序列，據此獲得相應基因。