Question

【題目】苦蕎富含黃酮類化合物等營養物質，在降血糖、降血脂等方面功效顯著。查爾酮合成酶（CHS） 是黃酮類化合物合成的關鍵酶，下圖為將CHS基因導入苦蕎，培育髙產黃酮苦蕎品系示意圖。

（1）基因工程的核心是 。

（2）可利用 、 方法獲取CHS基因。

（3）過程①中切開質粒的酶是 。它能在質粒特定的部位切割的原因是 。

（4）過程②、③分別是 。苦蕎細胞能培養成植株的根本原因是 。

（5）為培育轉基因苦蕎植物，還可將該植物幼葉消毒后，用 酶混合液處理，獲得了原生質體。酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇，其作用是 。將目的基因導入到原生質體，經培養形成愈傷組織，再通過 得到分散的胚性細胞，發育成 ,生長發育后獲得該轉基因植株。

（6）愈傷組織繼代次數過多會喪失細胞全能性的表達能力，下列原因錯誤的是 。（填選項編號）

A．愈傷組織發生遺傳變異

B．愈傷組織不能分散成單細胞

C．愈傷組織中激素平衡發生改變

D．愈傷組織對外源激素敏感性發生改變

Answer 1

【答案】（1）構建重組DNA分子

（2）從基因文庫獲取、化學方法合成成PCR合成

（3）限制性核酸內切酶（限制酶） 能識別特定的核苷酸序列并在特定的切點上切割DNA分子

（4）脫分化、再分化 植物細胞的全能性（細胞中含有發育成完整個體所必需的全部基因）

（5）纖維素酶和果膠酶（寫全才得分）維持滲透壓 液體懸浮培養 胚狀體

（6）B

【解析】

試題分析：（1）基因工程的核心是構建基因表達載體（即重組DNA分子）。

（2）獲取目的基因的方法有：從基因文庫獲取、化學方法合成成PCR合成。

（3）過程①中切開質粒的酶是限制性核酸內切酶（限制酶），它能在質粒特定的部位切割的原因是限制酶能識別特定的核苷酸序列并在特定的切點上切割雙鏈DNA分子。

（4）過程②是脫分化形成愈傷組織，過程③是再分化形成試管苗。苦蕎細胞能培養成植株的根本原因是植物細胞的全能性（細胞中含有發育成完整個體所必需的全部基因）。

（5）由植物細胞獲得原生質體，需要用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。處理過程中酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇，其作用是維持滲透壓，防止原生質體被過度吸水或者失水死亡。將目的基因導入到原生質體，經培養形成愈傷組織，再通過液體懸浮培養得到分散的胚性細胞，發育成胚狀體,生長發育后獲得該轉基因植株。

（6）愈傷組織繼代次數過多會喪失細胞全能性的表達能力，可能的原因有愈傷組織發生遺傳變異，愈傷組織中激素平衡發生改變，愈傷組織對外源激素敏感性發生改變等，所以本題選B。