Question

【題目】回答下列（一）（二）小題

（一）請回答泡菜制作以及乳酸菌分離純化有關問題

（1）制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是________。為了縮短制作時間，可在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入少量陳泡菜液的作用是________。從開始制作到泡菜品質最佳這段時間內，泡菜液逐漸變酸。這段時間內泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規律是________。

（2）某同學嘗試從新鮮的泡菜濾液中分離純化乳酸菌。首先需要用________對泡菜液進行梯度稀釋，之后用________法接種到滅菌的培養基上，進行培養。培養過程不需要的操作是________（A．倒置 B．恒溫 C．無氧 D．充入CO2）

（二）白菜、甘藍均為二倍體，體細胞染色體數目分別為 20、18。“白菜—甘藍”是用細胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短、耐熱性強和易于儲藏等優點。下圖是“白菜—甘藍”的雜交過程示意圖，回答以下問題：

（1）為了得到原生質體需在0．5—0．6mol/L的__________環境中用_______來處理白菜細胞和甘藍細胞。

（2）通常用________誘導原生質體融合，融合完成的標志是 ____________。在組織培養的過程中，植株幼苗的根、芽完全長成，將幼苗移至__________中，保持80%濕度，并逐漸降低濕度，直到與自然濕度接近后，移栽至土壤定植。

（3）通常情況下，白菜和甘藍有性雜交是不能成功的，原因是____，若對白菜和甘藍采用雜交育種 方法能成功的話，則得到的后代應含的染色體數和通過圖示方法所獲得的植株的染色體數分別是_____。

（4）植物體細胞雜交技術和傳統雜交技術相比的優點是 _____________。

Answer 1

【答案】殺滅微生物 增加乳酸菌數量（接種乳酸菌菌種） 乳酸菌數量增多，雜菌數量減少 無菌水 涂布分離 D 甘露醇 果膠酶 聚乙二醇（PEG） 新細胞壁形成 草炭土或蛭石 存在生殖隔離 19，38 克服遠緣雜交不親和

【解析】

1、泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠將蔬菜中的葡萄糖氧化為乳酸。

2、泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調味裝壇、密封發酵。

3、泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定，即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應生成重氮鹽，重氮鹽與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。

4、植物體細胞雜交的具體過程：

5、植物體細胞雜交的意義：克服元源雜交不親和的障礙

Ⅰ（1）制作泡菜時，所用鹽水要煮沸，其目的是消毒殺菌或滅菌除氧。陳泡菜液含有乳酸菌，可為泡菜發酵提供菌種，因此為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液；泡菜制作過程中，由于乳酸菌進行無氧呼吸產生乳酸，泡菜液逐漸變酸，隨乳酸菌的數量增加，泡菜液的酸性增強，不耐酸的雜菌數量逐漸減少。

（2）分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋，之后用涂布分離法接種到滅菌的固定培養基上，進行培養。培養過程需要將培養皿倒置放在無氧，恒溫的培養箱中培養，故需要ABC三項操作，不需要D沖入二氧化碳。

Ⅱ（1）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，為了得到白菜和甘藍的原生質體，根據酶的專一性原理，可在0.5-0.6mol/L的甘露醇環境中用纖維素酶和果膠酶來處理白菜細胞和甘藍細胞，從而去除細胞壁。

（2）通常用PEG（聚乙二醇）誘導原生質體融合；融合完成的標志是再生出新的細胞壁。在組織培養的過程中，植株幼苗的根、芽完全長成，將幼苗移至草炭土或蛭石中，保持80%濕度，并逐漸降低濕度，直到與自然濕度接近后，移栽至土壤定植。

（3）如圖通過植物體細胞雜交技術獲得的“白菜一甘藍”體細胞染色體數為20+18=38；通常情況下，由于白菜和甘藍之間存在生殖隔離，因此白菜和甘藍有性雜交是不能成功的；若對白菜和甘藍采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代20/2+18/2=19條染色體。

（4）植物體細胞雜交技術和傳統雜交技術相比的優點是克服元源雜交不親和的障礙，培育作物新品種。