Question

【題目】為了獲得治療癌癥效果更好的抗體，科學(xué)家對(duì)鼠源抗體進(jìn)行了如下的改造過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中通過基因________，對(duì)現(xiàn)有的鼠源抗體進(jìn)行改造，這項(xiàng)技術(shù)稱為___________。

（2）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了圖中給出的結(jié)構(gòu)外，還應(yīng)具有_______、________。

（3）目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入漿細(xì)胞常用方法是____________________，為了使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳，需要將目的基因插入到受體細(xì)胞的____________DNA上。

（4）讓漿細(xì)胞與______________細(xì)胞進(jìn)行雜交，并通過選擇培養(yǎng)基以及____________和抗體檢測(cè)，才能獲得足夠數(shù)量既能無限增殖又能產(chǎn)生嵌合抗體的細(xì)胞。

Answer 1

【答案】修飾 蛋白質(zhì)工程 標(biāo)記基因 復(fù)制原點(diǎn) 顯微注射技術(shù) 染色體 （骨髓）瘤細(xì)胞 克隆化培養(yǎng)

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

(1) 目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

(2) 基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

(3)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

(4) 目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）圖中通過將目的基因?qū)�入缺陷�?xì)胞或其他細(xì)胞，目的基因的表達(dá)產(chǎn)物可修飾和改變?nèi)毕菁?xì)胞的功能或使原有的功能得到加強(qiáng)，稱為基因修飾；現(xiàn)有的鼠源抗體屬于蛋白質(zhì)分子，對(duì)其進(jìn)行改造的技術(shù)稱為蛋白質(zhì)工程。

（2）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了圖中給出的結(jié)構(gòu)：目的基因、啟動(dòng)子、終止子外，還應(yīng)具有標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)。

（3）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，目的基因表達(dá)載體導(dǎo)入漿細(xì)胞常用方法是顯微注射法。將目的基因插入到受體細(xì)胞的染色體DNA上，可使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳。

（4）讓漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，并通過選擇培養(yǎng)基以及克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，才能獲得足夠數(shù)量既能無限增殖又能產(chǎn)生嵌合抗體的細(xì)胞，稱為雜交瘤B細(xì)胞，它產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原起作用的抗體稱為單克隆抗體。