Question

【題目】某生物興趣小組以α-淀粉酶為實驗材料進行系列實驗：一是用凝膠色譜法測定α-淀粉酶的相對分子質量，二是用包埋法固定α-淀粉酶來探究固定化酶催化效果。請回答下列問題：

（1）凝膠色譜法的原理是__________________________。

（2）某人欲使用凝膠色譜法比較α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質的分子質量大小，請你選擇需要的材料，借用下圖的實驗裝置，幫助其設計實驗步驟，并預測實驗結果，得出相關結論。

實驗步驟：將含有α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質的混合液加入裝滿凝膠的玻璃管上端，用_________________進行洗脫，檢測其_________________________。實驗結果及結論： _____________________。

（3）該小組同學用瓊脂作載體，用包埋法固定—淀粉酶來探究固定化酶催化效果。實驗結果如下：(注：假設加入試管中的固定化淀粉酶量與普通—淀粉酶量相同)

	1號試管	2號試管
固定化淀粉酶	√
普通—淀粉酶		√
淀粉溶液	√	√
60℃保溫5分鐘，取出冷卻至室溫，滴加碘液
現象	變藍	不變藍

①該實驗設計體現了________原則。

②1號試管變藍的原因是______________。

Answer 1

【答案】根據相對分子質量的大小分離蛋白質 緩沖液 洗脫的先后次序 若—淀粉酶先于唾液淀粉酶洗脫出來，則—淀粉酶的相對分子質量大于唾液淀粉酶；若唾液淀粉酶先于—淀粉酶洗脫出來，則唾液淀粉酶的相對分子質量大于—淀粉酶 對照原則、單一變量原則 因為淀粉分子太大難以通過瓊脂擴散與淀粉酶接觸而導致反應無法進行

【解析】

凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小來分離蛋白質的有效方法，相對分子質量小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質量不同的蛋白質得以分離．

（1）凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質利的一種方法．

（2）α-淀粉酶與唾液淀粉酶是兩種不同的酶，其分子質量不同，因此可用凝膠色譜法將其分離，其實驗步驟如下：實驗步驟：將含有α-淀粉酶、唾液淀粉酶兩種蛋白質的混合液加入裝滿凝膠的玻璃管上端，用緩沖液進行洗脫，檢測其洗脫的先后次序．實驗結果及結論：若—淀粉酶先于唾液淀粉酶洗脫出來，則—淀粉酶的相對分子質量大于唾液淀粉酶；若唾液淀粉酶先于—淀粉酶洗脫出來，則唾液淀粉酶的相對分子質量大于—淀粉酶．

（3）①該實驗中設置了對照組（2號試管），而且只有一個變量（加入的酶是固定化淀粉酶還是普通α-淀粉酶），因此體現了對照原則和單一變量原則．
②1號試管中加入的是固定化淀粉酶，由于淀粉分子太大難以通過瓊脂擴散與淀粉酶接觸，因而導致反應無法進行，所以加碘液后變藍．